抗肝衰复方治疗重型肝炎的临床观察及对急性肝衰竭大鼠防护作用的实验研究

摘要

目的：观察抗肝衰复方治疗重型肝炎的临床疗效，并建立急性肝衰竭大鼠模型，研究抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠的防护作用，探讨其可能的机制。 方法：1.临床观察：以120例重型肝炎患者为研究对象，随机分为对照组60例，给予常规西医综合治疗；治疗组60例，在常规西医治疗的基础加用抗肝衰复方(口服/灌肠)治疗，100ml/次，1剂/d，14天为1个疗程，治疗时限为3个疗程。观察临床症状、体征变化，比较肝功能改善情况及有效率。2.实验研究：健康雄性wistar大鼠110只，体重180-220克，随机分为6组：正常组10只，模型组20只，PHGF阳性对照组20只，茵陈蒿汤组20只，抗肝衰复方小剂量组20只、大剂量组20只。除正常组外其余各组分别给予 D-GalN800mg/kg和LPS 0.1mg/kg的剂量，腹腔注射，造急性肝衰竭模型(已经过预实验揭示此造模方法成功)，正常组给予等量生理盐水腹腔注射。各组均于造模后2h用药，按每次1.5ml/100g，分上下午每天两次灌胃，连用3天。PHGF阳性对照组，按药物浓度1.28mg/ml灌服 PHGF；菌陈蒿汤组，按生药浓度2.4g/ml灌服中药；抗肝衰复方小剂量组，按生药浓度3.75g/ml灌服中药；抗肝衰复方大剂量组，按生药浓度7.5g/ml灌服中药；模型组和正常组均分别按1.5ml/100g灌服生理盐水。造模后，观察各组大鼠病死率，72h后全部摘眼球取血，查血清ALT、AST、FBil、TNF-α，并迅速剪取大鼠肝左叶用10％中性甲醛固定送病理检查，光镜观察肝组织病理变化，以免疫组化法检测TNF-α在大鼠肝组织中的表达情况。 结果：1.临床观察结果治疗组有效率71.7％，显效率48.3％；对照组有效率 51.7％，显效率20.2％，两组比较，差异显著(P<0.05或P<0.01)；治疗3个疗程后临床症状及体征缓解，证候积分治疗组明显低于对照组(P<0.05)；血清AST、TBil也明显改善，与治疗前比较，差异显著(P<0.05或P<0.01)。2.实验研究结果：(1)大鼠病死率：造模后，大鼠病死率明显升高。模型组与正常组比较，差异有非常显著性意义(P<0.01)；抗肝衰复方大剂量、PHGF阳性对照组与模型组比较，差异有显著性意义(P<0.05)。(2)大鼠肝功能：造模72h后，反映大鼠肝功能的血清ALT、AsT、TBil水平明显升高。模型组显著高于正常组(P<0.01)；PHGF阳性对照组、茵陈蒿汤组及抗肝衰复方大、小剂量组较模型组均低，与模型组比较，PHGF阳性对照组、抗肝衰复方大剂量组差异有显著性意义(P<0.01或P<0.05)，茵陈蒿汤组、抗肝衰复方小剂量组差异亦显著(P<0.05)；抗肝衰复方大小剂量、茵陈蒿汤组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。(3)大鼠血清TNF-α水平：大鼠在造模72h后，血清 TNF-α含量模型组较正常组显著增高(P<0.01)；PHGF阳性对照组、茵陈蒿汤组及抗肝衰复方大、小剂量组较模型组均下降，PHGF阳性对照组、抗肝衰复方大剂量组与模型组比较，差异有非常显著性意义(P<0.01)，茵陈蒿汤组、抗肝衰复方小剂量组与模型组比较，差异有显著性意义(P<0.05)；抗肝衰复方大小剂量、茵陈蒿汤组与PHGF阳性对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；抗肝衰复方大小剂量、茵陈蒿汤组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。(4)大鼠肝组织病理学改变：正常组肝细胞以中央静脉为中心向外周呈放射状分布，模型组大鼠肝细胞可见肝小叶结构破坏，肝细胞呈弥漫性坏死，汇管区炎性细胞浸润程度较重。与模型组相比，PHGF 阳性对照组、茵陈蒿汤组、抗肝衰复方大、小剂量组肝细胞损伤程度均有改善，而以抗肝衰复方大剂量组改善最明显。(5)大鼠肝组织中 TNF-α的表达：正常组大鼠肝组织中，TNF-α的表达水平明显低于模型组(P<0.01)；PHGF阳性对照组、茵陈蒿汤组、抗肝衰复方大小剂量组较模型组亦低，与模型组比较，抗肝衰复方大剂量组、PHGF 阳性对照组差异有非常显著性意义(P<0.01)，茵陈蒿汤组、抗肝衰复方小剂量组差异有显著性意义(P<0.05)；抗肝衰复方大小剂量、茵陈蒿汤组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：1.在常规西医综合治疗的基础上，联合抗肝衰复方治疗重型肝炎，能提高临床疗效，缓解临床症状及体征，改善肝功能，是治疗重型肝炎的有效方法之一。2.抗肝衰复方能降低急性肝衰竭大鼠的病死率及血清ALT、AST、TBil水平；对 TNF-α生成有抑制作用，能显著降低血清 TNF-α水平；抑制 TNF-α在肝组织中的表达，并能减轻肝细胞损伤程度，改善肝组织病理学。由此可以证明抗肝衰复方对 D-氨基半乳糖和内毒素所致大鼠急性肝衰竭有防护作用，其作用机制可能是：①利胆退黄，护肝降酶，改善肝功能；②抑制 TNF-α产生，保护肝细胞，恢复肝功能；③解毒攻下，促进有毒物质的排泄，减少内毒素的来源和吸收，防止内毒素血症的发生，控制和减少各种并发症。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

前 言

第一部分抗肝衰复方治疗重型肝炎临床疗效观察

1临床资料

2方法

3结果

4小结

第二部分抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠防护作用的实验研究

1材料

2方法

3结果

4小结

讨论

1西医学对肝衰竭/重型肝炎的认识

2中医学对肝衰竭/重型肝炎的认识

3抗肝衰复方的组方特点及现代药理研究

4动物模型的选择与评价

5阳性对照药物的选择

6肿瘤坏死因子-α与ALF

7抗肝衰方治疗重型肝炎临床疗效分析及防治ALF的机制探讨

结语

参考文献

文献综述：肝衰竭/重型肝炎中医治疗进展

附 图

致 谢