UPR信号通路参与棕榈酸诱导的musclin基因表达的初步研究

摘要

Musclin是一种骨骼肌源性的分泌因子，其mRNA几乎只表达于骨骼肌，具有高度组织特异性。研究发现，Musclin在Ⅱ型糖尿病患者体内高表达，这一现象可能与其体内糖脂代谢紊乱有关。糖脂代谢紊乱常伴随着血液中游离脂肪酸增多，游离脂肪酸的主要组成成分为棕榈酸，推测棕榈酸对musclin基因的表达有一定的诱导作用。因此，早期研究利用棕榈酸处理分化的C2C12成肌细胞。结果发现，棕榈酸能够引起musclin基因的高表达；并且在棕榈酸的作用下，musclin基因的表达和内质网应激相关基因的表达呈正相关性。目前，针对内质网应激具体的某一条通路参与棕榈酸诱导musclin基因表达的情况，仍旧不太明确。
　　对此，本研究分别对内质网应激的三条经典通路：PERK信号通路、IRE1信号通路、ATF6信号通路进行了初步探究。采用通路抑制剂及sh-RNA技术进行通路的抑制和阻断，利用qRT-PCR及Western Blot技术进行通路相关分子的检测以确定通路的抑制及阻断情况。在此基础上，利用qRT-PCR检测musclin基因的表达情况，从而初步确定三条通路是否参与到棕榈酸诱导的musclin基因的表达过程中。
　　结果显示，当PERK信号通路被抑制或者阻断后，棕榈酸对musclin基因表达的诱导作用同样受到了明显的抑制，初步确定 PERK信号通路参与到棕榈酸诱导的musclin基因的表达过程中；当IRE1、ATF6信号通路被抑制或者阻断后，棕榈酸对musclin基因表达的诱导作用并未受到明显影响，初步确定IRE1和ATF6信号通路并不参与到棕榈酸诱导的musclin基因的表达过程中。此研究结果为糖尿病等代谢疾病的研究提供了新思路。

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第1章 绪 论

1.1 棕榈酸与Musclin的国内外研究现状

1.2 UPR反应的国内外研究现状

1.3 研究意义和主要研究内容

第2章 实验材料与方法

2.1实验材料

2.2 实验方法

第3章 PERK通路对棕榈酸诱导musclin表达的影响

3.1引言

3.2 PERK通路抑制剂GSK2656157对通路的抑制

3.3 sh-RNA干扰技术对PERK信号通路的阻断

3.4讨论

3.5本章小结

第4章 IRE1通路对棕榈酸诱导musclin表达的影响

4.1引言

4.2 IRE1通路抑制剂4μ8C对通路的抑制

4.3 sh-RNA干扰技术对IRE1信号通路的阻断

4.4讨论

4.5本章小结

第5章 ATF6通路对棕榈酸诱导musclin表达的影响

5.1引言

5.2 sh-RNA干扰技术对ATF6信号通路的阻断

5.3讨论

5.4本章小结

结论

展望

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果

声明

致谢