嗜热链球菌CRISPR多样性分析及CRISPR编辑载体构建

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嗜热链球菌CRISPR多样性分析及 CRISPR编辑载体构建

CRISPR DIVERSITY ANALYSIS OFSTREPTOCOCCUS THERMOOPHILUSAND INITIAL CONSTRUCTION OF ITSCRISPR EDITING VECTOR

摘 要

Abstract

第 1 章 绪论

1.1 课题来源及研究背景和意义

1.2 细菌 CRISPR-Cas 系统的研究进展

1.3 同源重组法构建突变体概述

1.4 CRISPRs 基因编辑技术研究进展

1.5 嗜热链球菌中双组分信号转导系统研究进展

1.6 本课题的主要研究内容

第 2 章 实验材料与方法

2.1 材料及仪器

2.2 S. thermophilus 中 CRISPRs-Cas 系统的分布

2.3 基因敲除型突变体的构建

2.4 pCasSth 基因编辑载体的构建

2.5 TCSs 基因敲除型 pCasSth 载体的构建

第 3 章 嗜热链球菌中 CRISPRs 分布

3.1 引言

3.2 S. thermophilμs 中 CRISPRs 位点的分布

3.3 cas 基因的序列信息及系统发育分析

3.4 本章小结

第 4 章 常规同源重组法敲除载体的构建

4.1 引言

4.2 pRV300 重组质粒的构建

4.3 本章小结

第 5 章 CRISPR-Cas9 基因编辑载体的构建

5.1 引言

5.2 pCasSth 质粒的构建

5.3 CRISPR 基因编辑载体的构建

5.4 本章小结

结 论

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果

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致 谢