安祖花（Anthurium andraeanumLind）花发育、组织培养及RAPD分析

摘要

安祖花是国际上非常流行并深受人们欢迎的一种高档切花材料与盆栽品种，随着插花艺术的发展，安祖花一跃成为插花业的“耀眼新星”，与世界四大切花品种一样，跻身于国际花卉市场，是第二大热带花卉，所以研究和开发这一花卉对满足国内花卉市场需求及出口创汇具有重要意义。　　本文利用石蜡切片技术与电子显微镜技术对安祖花的繁殖器官发育过程和结构进行研究，从花发育的角度探讨其败育原因；建立了安祖花组织培养再生体系并利用RAPD技术对八个品系的安祖花的亲缘关系进行鉴定，结果如下：　　花发育的研究表明，安祖花的花芽分化是以一叶芽一花芽的方式进行；小孢子与雄配子体的发育过程均属于正常发育，花药壁的发育属于基本型，绒毡层细胞属于腺质绒毡层，成熟的花粉粒为2-细胞型。安祖花的雌蕊是由2心皮组成，胚珠为直生胚珠，双珠被，77％珠心细胞在胞原细胞形成之前停止发育，并且逐渐解体消失，23％珠心细胞发生萎缩，导致雌蕊败育.　　安祖花组织培养的最佳外植体为棕色叶片；最佳消毒时间为0.1％的升汞消毒5min；最佳碳源：诱导初期3％的葡萄糖的诱导效果最佳，后期培养以2％蔗糖+1％葡萄糖的培养效果较好；最佳基本培养基为1/2MS。诱导产生愈伤组织的最佳培养基为：1/2MS+KT(0.1mg/L)+6-BA(0.05mg/L)+2.4-D(0.4mg/L)；诱导产生丛生芽的最佳培养基为：1/2MS+6-BA(0.3mg/l)+NAA0.2+KT(0.05mg/l)诱导生根的最佳培养基为：1/2MS+NAA(0.05mg/L)。　　实验采用了RAPD技术分析了8个安祖花品系，用30个随机引物对供试材料进行PCR扩增，筛选出10个稳定性好，条带清晰的引物，根据扩增结果得出相似系数，并进行UPGMA聚类分析，结果表明：8个品系的安祖花的遗传背景比较窄，各品系之间的相似系数较大，表明这8个品系的亲缘关系较近，聚类结果与形态学分类相一致，说明RAPD技术可作为安祖花亲缘关系鉴定的有效手段。

目录

文摘

英文文摘

1前言

1.1安祖花的研究进展

1.1.1安祖花生物学特性

1.1.2安祖花基因工程的研究

1.1.3安祖花生理及细胞学的研究

1.1.4安祖花采后保鲜技术的研究

1.1.5安祖花病虫害及防治的研究

1.1.6世界安祖花发展概况

1.1.7中国安祖花发展概况

1.2胚胎学的产生与发展

1.2.1胚胎学的产生

1.2.2当代胚胎学发展的主流

1.3观赏植物组织培养概述

1.3.1植物组织培养研究进展

1.3.2观赏植物组织培养

1.3.3安祖花组织培养

1.4 RAPD技术的发展、原理与应用

1.4.1 RAPD技术发展与原理

1.4.2 RAPD应用

1.5本研究目的及意义

2材料与方法

2.1实验材料

2.2主要仪器

2.3试剂与试剂配制

2.4实验方法

2.4.1安祖花花发育的观察

2.4.2安祖花的组织培养快繁体系的建立

2.4.3安祖花八个不同品系的RAPD分析

3结果与分析

3.1生殖生物学研究

3.1.1安祖花的形态特征

3.1.2花芽分化

3.1.3小孢子发生及雄配子体发育

3.1.4雌蕊与胚珠发育

3.1.5种子的解剖结构

3.2安祖花快繁体系的建立

3.2.1萌动前最佳培养条件的筛选

3.2.2愈伤组织诱导培养基中PGR的筛选结果

3.2.3芽分化培养基诱导中PGR的筛选结果

3.2.4壮苗与生根

3.2.5生根苗的驯化移栽

3.3不同品系安祖花的RAPD分析结果

3.3.1 DNA的最优提取方法

3.3.2 RAPD反应的优化

3.3.3不同品系的RAPD扩增结果

3.3.4数据的聚类结果

4讨论

4.1安祖花败育的原因

4.2安祖花快繁体系建立中的若干问题

4.2.1污染的控制

4.2.2碳源对诱导的效果

4.2.3培养基与生长调节物质的影响

4.2.4丛生芽的诱导

4.3不同安祖花品系RAPD分析中的问题探讨

4.3.1基因组DNA的提取

4.3.2 RAPD重复性问题

4.3.3遗传多样性分析

5结论

参考文献

攻读硕士期间发表的论文

致谢

图版说明1

图版说明2