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毒害艾美耳球虫感染雏鸡肠组织热休克蛋白的表达

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1引言

1.1鸡球虫

1.1.1鸡球虫的生物学特点

1.1.2鸡球虫生活史

1.1.3流行病学特征

1.1.4球虫感染雏鸡的临床症状及病理变化

1.2热休克蛋白的研究进展

1.2.1热休克蛋白的发展史

1.2.2热休克蛋白的分类和分布

1.2.3热休克蛋白的分子结构特征

1.2.4热休克蛋白基因及表达调控

1.2.5热休克蛋白主要生物学功能

1.2.6热休克蛋白在寄生虫感染中的作用

1.2.7展望

1.3实验研究的目的与意义

2材料与方法

2.1实验材料

2.1.1病原

2.1.2实验动物

2.1.3主要生物制剂及化学试剂

2.1.4主要仪器

2.2实验方法

2.2.1实验动物分组及处理

2.2.2被检材料采取及处理

2.2.3检测指标及方法

2.3数据处理

3实验结果

3.1 E.necatrix感染雏鸡肠组织HSP70、90mRNA的表达

3.1.1 E.necatrix感染雏鸡肠组织HSP70 mRNA的表达

3.1.2 E.necatrix感染雏鸡肠组织HSP90 mRNA的表达

3.2 E.necatrix感染雏鸡肠组织HSP70的表达

4讨论

5结论

致谢

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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摘要

本研究采用RT-PCR和SP免疫组织化学法等免疫病理学技术,全面系统地研究了 Enecatrix感染雏鸡后,不同时期雏鸡肠组织热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90(HSP90)表达的动态变化进行了检测。旨在探讨HSP70、HSP90在肠组织损伤过程中的可能作用和病理学意义,为Enecatrix感染雏鸡的防治提供新的思路和理论指导。 本研究发现,在Enecatrix感染雏鸡之前,实验雏鸡肠上皮细胞中均有HSP70及HSP90基础表达。而E.necatrix感染雏鸡之后,未观察到HSP90表达的明显变化,表明HSP家族不同成员在E.necatrix感染雏鸡引起的细胞损伤中发挥不同的作用。 本实验在进行肠组织HSP70表达的动态变化研究中发现,14日龄雏鸡感染Enecatrix后,肠组织HSP70表达于初次感染后第5天低于对照雏鸡,其中空肠和盲肠HSP70的表达明显低于对照雏鸡,随后升高,于感染后第14天达峰值。HSP70表达峰值的出现说明HSP70作为一种应激蛋白其保护作用具有时间依赖性,其可能起防止蛋白变性及聚集的作用。Enecatrix大剂量攻击性感染雏鸡后,Enecatrix两次感染雏鸡各段肠组织HSP70表达均不同程度明显降低至对照雏鸡。Enecatrix两次感染雏鸡可能由于初次感染后激发了机体的免疫系统,机体产生HSP70的水平有所恢复,之后升高至对照雏鸡呈基础表达。提示此时机体的损伤明显减少。 Enecatrix一次大剂量感染雏鸡各段肠组织HSP70表达均不同程度高于对照雏鸡。Enecatrix两次感染雏鸡十二指肠和空肠HSP70表达低于一次感染雏鸡,而回肠和盲肠则高于Enecatrix一次感染雏鸡。Enecatrix一次感染雏鸡可能由于大剂量攻击性感染造成肠组织的严重损伤,其HSP70表达反而受抑制,诱导产生。HSP70的水平较低,所以在感染后急剧下降。 综上所述,HSP70表达于正常肠组织说明肠组织的微环境始终处于应激状态并不断诱导HSP70表达;从另一个角度讲,Enecatrix感染雏鸡肠组织中HSP70表达增强并呈时间依赖性;E.necatrix感染雏鸡肠组织中HSP70表达增强,提示HSP70可能在Enecatrix感染雏鸡中对肠组织细胞变性蛋白起保护作用。

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