丰花月季体细胞无性系变异及NaN诱变变异的研究

摘要

本文对丰花月季体细胞无性系变异及NaN<,3>诱变变异进行了研究。主要内容及结果如下： 1、以丰花月季花器官的不同部位为外植体进行愈伤诱导。以花托作为外植体的适宜脱分化培养基为MS+6-BA1mg/L,+2,4-D0.5mg/L+KT1.5mg/L；以花瓣为外植体的适宜脱分化培养基为 MS+6-BA1mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA1mg/L；以花梗为外植体的适宜脱分化培养基为 MS+2,4-D0.5mg/L+TDZ1.5mg/L；以子房为外植体的适宜脱分化培养基为 MS+6-BA1mg/L+KT15mg/L+TDZ1.5mg/L。 2、花瓣愈伤组织的继代增殖诱导的适宜优化培养基为MS+6-Bmg/L+KT1mg/L+2,4-D0.Smg/L。花瓣愈伤组织诱导芽的适宜分化培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L+GA<,3>0.3mg/L。 3、150mg/L的NaN<,3>为半致死剂量的可作为以丰花月季组培苗为试材的诱变处理浓度，NaN<,3>对丰花月季组培苗诱导芽分化的抑制作用随着处理浓度增加而加强，体现在诱导组培苗芽分化的诱导率和芽分化数目的下降。 4、通过对丰花月季体细胞无性系变异的10个株系的50个样本和NaN<,3>诱变后代的30个株系的150个样本进行ISSR鉴定，确定了体细胞无性变异的10个株系的变异率为8％，获得变异植株4棵；NaN<,3>诱变后代的30个株系的变异率为17.3％，获得变异植株26棵，化学诱变的变异率高于体细胞无性系的变异率。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1研究的目的和意义

1.2月季现代育种研究概述

1.3月季组织培养的研究进展

1.3.1丛生芽的诱导的研究进展

1.3.2愈伤组织的诱导的研究进展

1.3.3植株再生的研究进展

1.3.4体细胞无性系变异的研究进展

1.4叠氮化钠(NaN3)的研究概述

1.4.1叠氮化钠(NaN3)的特点

1.4.2化学诱变剂NaN3在作物育种中的应用

1.5 ISSR 分子标记概述

1.5.1 ISSR分子标记技术概述

1.5.2 ISSR分子标记在月季中的应用

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1植物材料

2.1.2试剂

2.1.3试验仪器设备

2.2试验内容与方法

2.2.1丰花月季扩繁体系的建立

2.2.2试验材料的筛选

2.2.3丰花月季花器官再生体系的建立

2.2.4丰花月季组培苗的叠氮化钠(NaN3)诱变处理

2.2.5丰花月季体细胞无性系变异株系和NaN3诱变后代株系的ISSR分子鉴定

3结果与分析

3.1丰花月季扩繁体系的建立

3.1.1腋芽诱导分化结果

3.1.2试管苗生根培养结果

3.1.3生根苗驯化移栽结果

3.2试验材料的筛选

3.3丰花月季花器官再生体系的建立

3.3.1丰花月季花器官不同愈伤组织的诱导

3.3.2愈伤组织继代增殖的培养基优化

3.3.3愈伤组织诱导芽分化的结果

3.4丰花月季组培苗的NaN3诱变处理

3.5丰花月季体细胞无性系变异株系和NaN3诱变后代株系的ISSR分子鉴定

3.5.1供试材料基因组DNA的质量的检测

3.5.2引物的筛选及ISSR扩增结果

3.5.3丰花月季无性系变异株系和NaN3诱变后代株系的ISSR分子鉴定

4讨论

4.1试验材料的筛选

4.2丰花月季花器官再生体系的建立

4.2.1丰花月季花器官不同部位的脱分化培养

4.2.2丰花月季愈伤组织继代培养基的优化

4.2.3愈伤组织诱导芽分化

4.3丰花月季组培苗的NaN3诱变处理

4.3.1 NaN3对丰花月季组培苗芽分化的影响

4.3.2 NaN3剂量的确定

4.4丰花月季无性系变异和NaN3诱变两种变异方式的比较

5结论

致谢

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文