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声明
1引言
1.1选用月季为研究材料的目的与意义
1.2 eIF-5A基因的研究进展
1.2.1 eIF-5A在翻译后修饰起作用
1.2.2 eIF-5A翻译够修饰过程中的两个酶
1.2.3 eIF-5A不是一个传统意义上的翻译起始因子
1.2.4 eIF-5A的功能研究
1.2.5抑制植物eIF-5A的活性产生多向性作用
1.2.6抑制植物eIF-5A表达产生的多重效应可用于植物经济性状的改良
2材料与方法
2.1材料
2.1.1植物材料
2.1.2细菌载体和主要试剂
2.1.3主要的仪器设备
2.2方法
2.2.1月季eIF-5A基因cDNA的克隆
2.2.2月季基因组DNA提取Southem blot分析
2.2.3 RT-PCR
2.2.4 RceIF-5A的原核表达及抗His抗体的Western blot检测
2.2.5 RceIF-5A的大肠杆菌实验
2.2.6AntiRceIF-5A的酵母实验
3结果与分析
3.1月季eIF-5A基因的克隆和序列分析
3.2 RceIF-5A基因和其他物种eIF-5A基因的系统进化分析
3.3 Southern杂交分析
3.4 RT-PCR检测RceIF-5A基因的表达模式
3.5含有月季eIF5A编码基因的原核表达载体的构建与鉴定
3.6 Rc eIF-5A在E.coli中的诱导表达
3.7重组菌BL21(pET32a-eIF5A)对温度胁迫的抗性分析
3.7.1重组菌BL21(pET32a-eIF5A)在正常条件下的生长实验
3.7.2重组菌BL21(pET32a-eIF5A)在高温条件下的生长实验
3.7.3重组菌BL21(pET32a-eIF5A)在低温条件下的生长实验
3.8Anti-eIF-5A基因的真核表达载体构建与鉴定
3.9含有空载体和重组质粒pET32a-elF-5A的EcoliBL21在正常情况下的生长曲线
3.9.1酵母中anti-RcelF-5A在正常条件下的生长
3.9.2含有重组质粒anti-RceIF-5A的酵母在高温情况下的生长
4讨论
4.1月季eIF-5A基因的获得与生物信息学分析
4.2月季eIF-5A基因在大肠杆菌和酵母中的功能研究
4.3月季eIF-5A基因在不同器官中的表达特性和Southern blot分析
5结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文