营养及培养条件对大豆根腐病主要病原菌及其产毒的作用

摘要

试验根据不同病原菌毒素特有的紫外吸收光谱，应用紫外分光光度计定量原理，建立了病原菌毒素相对浓度定量测定方法，为大豆根腐病主要病原菌毒素的定量研究奠定了基础。得出镰孢菌和立枯丝核菌毒素浓度与其紫外吸光值(ODT)间的关系式： 镰孢菌毒素浓度(ug/ml)=-9.7895+1.5449ODT(F=319.0103R=0.9846)立枯丝核菌毒素浓度(ug/ml)=-6.9853+1.30090DT(F=748.5542R=0.9934)本论文通过系统量化试验，明确了不同培养条件(培养基、温度、通气量、pH值、光照)，大量元素(C、N、P、K)和微量元素(B、Mn、Mo、Cu、zn)对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长及产毒3项指标的定量作用，为大豆根腐病的调控提供了依据。 对镰孢菌产孢试验结果，在PD和PSC中产孢显著高于Richard和Ceapek。在5-30℃之间，随温度升高产孢量增加，30℃达到最高，30℃以上随温度增加产孢量减少。pH在5～8之间，随pH增加尖镰孢菌产孢减少，茄镰孢菌产孢增加，pH＜5或＞8均不适合产孢。通气越强产孢越少。Cu、zn随浓度增加对产孢抑制作用增强。Mn、Mo、Cu对产孢有一定促进作用。对镰孢菌产孢的最适培养条件为PD和PSC、30℃、pH=6～7、振荡频率在40～80r/min。尖镰孢菌和茄镰孢菌产孢最适营养组合C30N15P1K0.5(C、N、P、K分别为30/15/I/0.5g/L)和C30N5P0.5K0.5。当Mn为30mg/L、Mo为0.8mg/L、Cu为1.8mg/L时促进产孢。 对于镰孢菌菌丝，在PSC中生长最好。在5-30℃之间，随温度升高菌丝生长增强，至25-30℃菌丝生长达最高，30℃以上随温度增加菌丝生长减弱。pH在3～7之间，随pH增加菌丝生长增加，pH＞8时菌丝生长减弱。培养液中N含量越高菌丝生长效果越好。Mn、Mo、B在供试的浓度下均对菌丝生长有抑制作用，浓度越高抑制作用越强。筛选出的菌丝生长最适培养条件为PSC、25℃、pH=7、振荡频率在120～160r/min。最适营养元素处理为C30N1.5P0.5K1和C20N15P1.5K1.5，Cu为1.8mg/L、Zn为1.2mg/L。 对于镰孢菌产毒，在PSC中产毒最好，在5-30℃之间，随温度增加产毒增强，至25-30℃达到最大，30℃以上随温度增加产毒量减少。pH在3～7之间，随pH增加产毒增强，至pH=7时达最好，pH＞8时随pH增加产毒减弱。通气状况越好产毒量越高。试验中N含量越高产毒越好。Mn、Mo、B在供试浓度下对各镰孢菌产毒均有抑制作用。筛选出对产毒最适合培养条件为PSC、25℃、pH=7、振荡频率为160r/min。最优营养元素组合分别为C20N15P0.5K0.5、C40N15P0.5K0.5和C20N15P1K1，Cu为1.8mg/L、Zn为1.2mg/L。 不同培养条件对立枯丝核菌菌丝生长及产毒的试验结果表明：在5-30℃之间，随温度升高菌丝生长加快、产毒增强，至25-30℃菌丝生长和产毒达到最好，30℃以上随温度增加菌丝生长、产毒降低。pH在5～7之间，随pH增加菌丝生长、产毒增强，pH＞8时随pH增加菌丝生长、产毒减弱。通气可促进菌丝生长及其产毒。N含量增加促进菌丝生长。Mn、Mo、B随浓度增加对菌丝生长和产毒抑制作用增强。由此得出其菌丝生长的最适培养条件为Richard、30℃、pH=7、振荡频率为80r/min。最适的营养元素处理为C20N15P1.5K0.5，Cu为1.8mg/、Zn为1.2mg/L。对产毒最适合培养条件为Richard、25℃、pH=8、振荡频率为80r/min。最适的营养元素组合为C30N15P1K1.5，Cu、Zn分别为1.8mg/L和1.2mg/L。 不同条件和因素下，病原菌的产孢，菌丝生长及其产毒都有所不同，而产孢量，菌丝生长量和产毒量在病原菌致病中的作用既有区别又相互联系，本试验引入综合作用指数米衡量某一因素对病原菌产孢、菌丝生长和产毒这3项指标的综合作用。根据综合作用指数镰孢菌3项指标最适培养条件为PSC、25～30℃、pH=6～7、振荡频率为160r/min。最佳营养元素组合为C30N15P1.5K1.5。最具抑制作用的培养条件Richard、15℃、pH=9、静止培养。最具抑制作用营养元素组合为C20N5P0.5K0.5。立枯丝核菌最适培养条件为Richard、25～30℃、pH=7、振荡频率80r/min。最佳营养元素组合为C20N15P1.5K1.5。最具抑制作用的培养条件Ceapek、15℃、pH=5、静止培养。最具抑制作用营养元素组合为C20N5P0.5K0.5。Mn、B、Mo当浓度分别为60mg/L、2mg/L、0.8mg/L时对4种大豆根腐主要病原菌产孢、菌丝生长及产毒3项综合指标具有显著的抑制效果。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1大豆根腐病研究进展

1.1.1大豆根腐病的分布与危害

1.1.2大豆根腐病的症状

1.1.3大豆根腐病的病原

1.1.4病害侵染循环及影响发病因素

1.1.5火豆根腐病的防治

1.2植物病原菌毒素研究进展

1.2.1植物病原菌毒素的种类和特点

1.2.2病原菌毒素的分离和纯化

1.2.3真菌毒素生物活性测定方法

1.2.4植物病原菌毒素的致病机理

1.2.5植物病原菌毒素的应用

1.3大豆根腐病原菌毒素的研究现状

1.4大豆根腐病研究与防治存在的问题

1.5论文研究的目的和意义

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1供试菌株

2.1.2供试培养基

2.1.3大量元素

2.1.4微量元素

2.1.5供试大豆品种

2.2试验方法

2.2.1培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢及菌丝生长的影响

2.2.2.病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法

2.2.3培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产毒的影响

2.2.4培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用

3结果与分析

3.1培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢及菌丝生长的作用

3.1.1培养条件对病原菌产孢及菌丝生长的影响

3.1.2大量元素对病原菌产孢及菌丝生长的作用

3.1.3微量元素对病原菌产孢及菌丝生长的作用

3.2病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法

3.2.1镰孢菌粗毒素相对浓度的测定

3.2.2立枯丝核菌粗毒素相对浓度的测定

3.3培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产毒的作用

3.3.1培养条件对病原菌产毒的影响

3.3.2大量元素对病原菌产毒的作用

3.3.3微量元素对病原菌产毒的作用

3.4培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用

3.4.1培养条件对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用

3.4.2大量元素对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用

3.4.3微量元素对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用

4讨论

4.1病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法

4.2关于综合作用指数和综合抑制指数

4.3关于微量元素对病原菌作用试验结果

5结论

致谢

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文