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声明
1前言
1.1研究的目的和意义
1.2国内外研究现状
1.2.1高等植物的氮素营养
1.2.2植物谷氨酰胺合成酶的研究现状
1.2.3植物基因克隆技术研究现状
1.2.4谷氨酰胺合成酶的生物信息学研究现状
2材料与方法
2.1试验材料
2.1.1供试品种
2.1.2主要分子和生化试剂
2.1.3主要仪器设备
2.2试验设计
2.2.1引物设计
2.2.2试验研究方法
2.2.3试验技术路线
2.3主要试验方法
2.3.1 GS1和GS2 cDNA的克隆及序列分析
2.3.2 GS2基因组DNA的克隆及序列分析
2.3.3氮素对甜菜GS活力及基因表达的影响
2.3.4氮素诱导后放线菌素D和放线菌酮对甜菜GS活力及基因表达的影响
3结果与分析
3.1甜菜GS1cDNA和GS2cDNA基因的克隆
3.1.1甜菜总RNA的提取及检测
3.1.2 GS1cDNA和GS2cDNA基因的获得
3.1.3 GS1cDNA和GS2cDNA基因的生物信息学分析
3.2甜菜GS2 DNA基因的克隆
3.2.1甜菜总DNA的提取及检测
3.2.2 GS2DNA基因的获得
3.3甜菜GS基因的表达分析
3.3.1氮素对甜菜GS基因表达的影响
3.3.2氮素诱导后核酸与蛋白合成抑制剂对甜菜GS基因表达的影响
4讨论
4.1甜菜GS基因的克隆
4.1.1甜菜的诱导处理及RNA的提取
4.1.2甜菜GS基因及克隆方法
4.2甜菜GS的生物信息学分析
4.3甜菜谷氨酰胺合成酶基因的表达分析
4.3.1氮素对甜菜GS基因表达的影响
4.3.2氮素诱导后核酸与蛋白合成抑制剂对甜菜GS基因表达的影响
5结论
致 谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文