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【6h】

卵泡发育和黄体形成过程中SPARC基因在小鼠卵巢中的表达与调节

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声明

1前言

1.1卵泡发育与黄体形成和退化的研究进展

1.2SPARC基因的研究进展

1.2.1SPARC基因的生物学特性

1.2.2SPARC基因的作用机制和功能

1.2.3SPARC基因与雌性生殖

1.3本研究的目的和意义

2.材料与方法

2.1实验动物

2.2动物模型

2.2.1小鼠性成熟模型

2.2.2eCG诱导卵泡发育模型

2.2.3hCG诱导的排卵模型

2.2.4hCG诱导的黄体形成和退化模型

2.2原位杂交

2.2.1cRNA探针的制备

2.2.2原位杂交过程

3结果

3.1SPARC在小鼠卵巢中的表达

3.1.1SPARC在小鼠性成熟卵巢中的表达

3.1.2SPARC在小鼠卵泡发育过程中的表达

3.1.3SPARC在小鼠成熟卵泡排卵过程中的表达

3.1.4SPARC在小鼠黄体形成与退化过程中的表达

4讨论

4.1SPARC与卵泡发育

4.2SPARC与排卵

4.3SPARC与黄体的形成与退化

5结论

致谢

参考文献

图版

攻读硕士学位期间发表的论文

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摘要

富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)是一种对细胞活性有广泛影响的基质相关的糖蛋白。SPARC及其相关蛋白可以与细胞外基质相互作用,影响细胞外基质分子的表达、调整细胞的形态、减少细胞间的粘附、影响细胞的迁移以及由生长因子诱导的细胞增殖和血管发生,并在肿瘤发生、损伤修复以及胚胎发育等过程中发挥着重要作用。 本实验利用原位杂交,研究了SPARC在小鼠卵巢中的时空特异性表达情况。利用小鼠性成熟模型、eCG诱导的卵泡发育模型、hCG诱导的排卵模型以及黄体形成和退化模型,研究了SPARC在小鼠卵泡发育和黄体形成与退化过程中的调节。在小鼠的性成熟过程中,SPARC在卵巢基质中弱表达,在发育卵泡的卵泡膜细胞中较强表达,而在颗粒细胞和卵母细胞中都不表达。在eCG诱导的卵泡发育过程中,注eCG6小时之后,SPARC在卵泡膜细胞和卵巢基质中的表达开始上调,之后显著增强,48小时在膜细胞和卵巢基质中都强表达。注eCG后再注hCG,SPARC在卵巢基质和膜细胞中的表达维持在高水平,注hCG9小时之后壁层颗粒细胞开始弱表达,之后逐渐增强,13小时排卵时在壁层颗粒细胞强表达。注hCG24小时后,SPARC在卵巢的新生黄体中强表达,并且这种表达情况一直持续到结构性的黄体退化。在结构性退化的黄体中,仅能在基质细胞观察到基本水平的SPARC表达,在发育卵泡的膜细胞有较强水平的表达。这些结果表明,SPARC可能在小鼠卵泡发育和黄体形成与退化过程中起重要作用。

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