米尔贝肟片在犬血浆中的药物代谢动力学研究

摘要

新兽药的临床前药代动力学研究是新药评价的重要组成部分,该项研究的前提条件是必须建立灵敏和特异的定量分析方法,再应用数学处理方法,定量描述药物及其他外源性物质在体内的动态变化规律,研究机体对药物吸收、分布、代谢和排泄等的处置以及所产生的药理学和毒理学意义。米尔贝肟属于大环内酯类抗生素,是米尔贝霉素A3和A4的肟衍生物,目前是国外防治犬猫体内外寄生虫的特效药,能特效防治恶心丝虫、高效防治钩口圆虫、鞭虫、蛔虫等体内寄生虫,以及毛囊虫、疥癣、虱、跳蚤等体外寄生虫。米尔贝肟具有高效、低毒特点而受到国内市场关注。随着国外对该药专利保护失效期的临近,相信将很快出现于中国市场。本文在建立测定犬血浆中米尔贝肟浓度的液相色谱一串联质谱法的基础上,进行了该药在血浆中的药代动力学研究,从而为指导临床合理用药提供理论依据。
　　 采用固相萃取的样品前处理方法,建立了血浆中米尔贝肟含量检测LC-MS/MS法,固定相为HypersilC18柱(150mm×4.6mmID,5μm粒径),以乙腈-5mmol·L-1乙酸铵(85:15,v/v)为流动相,流速0.25mL·min-1。采用电喷雾离子化源(ESI源)以正离子方式检测,离子扫描。米尔贝肟在5～500ng·mL-1范围内,浓度与响应比呈良好的线性关系,犬血浆样品工作曲线为y=94.2379x-60.4477,r=0.999551。检测限为2.5ng·mL-1,定量限为5ng·mL-1。该方法样品回收率、基质抑制率、方法专属性、精密度和准确度、稳定性等均符合质谱检测的要求。
　　 以Beagle犬为试验动物,采用随机分组、自身交叉设计。试验分为米尔贝肟静脉给药组(0.25mg·kg-1·bw);米尔贝肟片内服低、中、高剂量组(分别为0.125、0.25、0.5mg·kg-1·bw)和参比药物(进口米尔贝肟片)对照组(0.25mg·kg-1·bw)。给药后不同时间点采取血样,进行LC-MS/MS检测。采用3p97药代动力学软件对受试药物和参比药物试验组的药-时数据进行分析。
　　 结果表明,犬分别以0.125、0.25、0.5mg·kg-1·bw三个剂量内服米尔贝肟片后,药物在体内的动力学过程符合一室模型,三个剂量组Cmax、Tmax、t1/2、AUC0-t、AUC0-∞分别为:36.5、76.11、182.05ng·mL-1;4.14、4.27、4.06h;15.06、11.09、9.76h:964.34、1568.61、3440.47ng·hmL-1;985.83、1663.12、3558.04.ng·hmL-1。参比药物在犬体内的动力学过程符合一室模型,0.25mg.kg-1·bw剂量内服的Cmax为74.25ng·mL-1;Tmax为4.07h;t1/2(ke)为11.66h:AUC0-t为1517.99ng·hmL-1,AUC0-∞为1649.64ng·hmL-1。表明米尔贝肟片经内服后在犬体内缓慢吸收入血,48h内血中90％以上的药物分布到组织和体液中,之后缓慢下降,消除半衰期较长。以内服和相同剂量下静脉给予米尔贝肟后获得的ALJCtM值计算其绝对生物利用度为76.57％。
　　 对单剂量米尔贝肟片与犬心安在犬体内的主要药动学参数(AUC0-t,AuC0-∞,Cmax,Tmax)进行单双侧t检验,在制剂间无显著性差异,各项t1和t2均大于2.132,90％置信区间在80％～120％内,均符合生物等效性的要求,表明二者具有生物等效性。