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摘要
1 引言
1．1 镉的概述
1．1．1 镉的理化性质
1．1．2 镉的污染现状及危害
1．2 镉的肾毒性作用
1．3 镉毒性与核受体应答
1．4 镉与氧化应激
1．4．1 氧化应激
1．4．2 镉致氧化应激
1．5 镉与线粒体损伤
1．5．1 线粒体损伤概述
1．5．2 氧化应激与线粒体损伤
1．5．3 线粒体未折叠蛋白反应
1．6 镉与Nrf2信号通路
1．6．1 Nrf2概述
1．6．2 Nrf2抗氧化机制
1．6．3 镉与Nrf2信号通路
1．7 试验的目的与意义
2 材料与方法
2．1 药品与试剂
2．2 主要仪器
2．3 试验动物与染毒方法
2．4 组织样品的采集与处理
2．5 鸡肾脏形态结构观察
2．5．1 肾脏病理解剖学观察
2．5．2 肾脏病理组织学观察
2．5．3 肾脏超微结构观察
2．6 鸡肾脏功能检测
2．7 鸡肾脏组织抗氧化功能的测定方法
2．7．1 肾脏组织中蛋白定量测定
2．7．2 肾脏组织中氧化产物的测定
2．7．3 肾脏组织中抗氧化酶的检测
2．7．4 肾脏组织中抗氧化水平的检测
2．8 肾脏组织中CYP450酶系的检测
2．8．1 肾微粒体的制备
2．8．2 肾脏组织中CYP450酶系的测定
2．9 鸡肾脏组织mRNA表达水平的检测
2．9．1 鸡肾脏组织总RNA的提取
2．9．2 RNA反转录反应
2．9．3 看家基因引物的设计及合成
2．9．4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)
2．10 镉致鸡肾脏线粒体损伤的检测
2．10．1 线粒体形态结构观察
2．10．2 线粒体膜电位的检测
2．10．3 线粒体功能及未折叠蛋白反应相关基因mRNA表达的检测
2．11 肾脏组织中Nrf2信号通路的检测
2．11．1 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的测定
2．11．2 肾脏Nrf2基因表达水平的测定
2．11．3 肾脏Nrf2信号通路相关分子表达的测定
2．12 肾脏组织中核受体及CYP450亚基基因水平的测定
2．13 试验数据的分析与统计
3 结果
3．1 肾脏组织形态学观察结果
3．1．1 肾脏病理组织学观察结果
3．1．2 肾脏超微结构观察结果
3．2 镉致肾脏功能损伤的检测结果
3．3 镉暴露干扰肾脏线粒体的损伤的检测结果
3．3．1 线粒体超微结构结果
3．3．2 线粒体膜电位的检测结果
3．3．3 线粒体功能蛋白相关分子的检测结果
3．3．4 线粒体未折叠蛋白反应相关分子的检测结果
3．4 镉暴露干扰鸡肾脏组织中抗氧化功能的检测结果
3．4．1 肾脏组织中H2O2与MDA含量检测结果
3．4．2 肾脏组织中抗氧化酶活性的检测结果
3．4．3 肾脏组织中T-AOC能力的检测结果
3．5 镉暴露干扰肾脏组织中Nrf2信号通路的检测结果
3．5．1 肾脏组织中Nrf2 mRNA表达水平的检测结果
3．5．2 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的检测结果
3．5．3 肾脏组织中Nrf2信号通路相关因子的检测结果
3．6 镉暴露干扰肾脏组织核受体应答与CYP450酶系的检测结果
3．6．1 肾脏组织中CYP450酶系蛋白活性的检测结果
3．6．2 肾脏组织中核受体CAR、AHR与PXR的检测结果
3．6．3 肾脏组织中CYP450酶系亚型mRNA的检测结果
4 讨论
4．1 镉致鸡肾脏的毒性作用
4．2 镉对鸡肾脏线粒体损伤的影响
4．3 镉对鸡肾脏线粒体未折叠蛋白反应的影响
4．4 镉对鸡肾脏氧化应激及Nrf2信号通路的影响
4．5 镉对鸡肾脏核受体应答的影响
5 结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
