声明
摘要
1文献综述
1.1实验小型猪
1.2代谢性疾病
1.3 ENU诱变
1.4高脂诱导动物模型
1.5基因编辑动物模型
2 ENU诱变构建代谢类疾病模型动物的研究
2.1实验材料
2.1.1实验动物
2.1.2实验试剂
2.1.3实验仪器
2.2实验方法
2.2.1大白猪ENU诱变
2.2.2巴马香猪ENU诱变
2.3实验结果
2.3.1诱变大白猪遗传家系的组建
2.3.2诱变巴马猪遗传家系的组建
2.3.3诱变F3个体表型监测
2.4讨论
3 F3代巴马小型猪高脂诱导模型建立及其肝脏转录组学研究
3.1材料与方法
3.1.1实验动物及试剂
3.1.2实验方法
3.2实验结果
3.2.1高脂诱导对生长指标的影响
3.2.2高脂诱导对血常规的影响
3.2.3高脂诱导对生化指标的影响
3.2.4高脂诱导猪的冠脉造影检测
3.2.5高脂诱导对猪各器官组织学水平的影响
3.2.6高脂诱导对肝脏转录组的影响
3.3讨论
4基于IRS-2构建代谢疾病模型的研究
4.1实验材料
4.1.1实验动物
4.1.2实验试剂
4.1.3实验仪器
4.2实验方法
4.2.4荧光定量PCR
4.2.5免疫组化
4.2.6 Westem blot
4.2.7 RNA干扰
4.2.8卵母细胞成熟培养
4.2.9利用CRISPR/Cas9构建IRS-2敲除细胞
4.2.10体细胞核移植
4.3实验结果
4.3.1猪IRS-2序列的获取与分析
4.3.2 IRS-2在猪各组织中的表达
4.3.3下丘脑和大脑皮层组织中IRS-2的分布
4.3.4 IRS-2敲低对猪肝细胞功能的影响
4.3.5 IRS-2敲低PAEC细胞的建立和表征
4.3.6 IRS-2敲除对猪克隆胚胎体外发育的影响
4.4讨论
5结论
致谢
参考文献
附录
攻读博士学位期间发表的学术论文