声明
摘要
1 前言
1．1．2氯胺酮的药理作用
1．1．3氯胺酮的神经毒性
1．2 PI3K／AKT信号通路研究进展
1．2．2 PI3K／AKT信号通路的几个重要信号分子
1．2．3 PI3K／AKT／GSK3信号通路与神经损伤
1．3神经节苷脂及其神经保护作用
1．3．1神经节苷脂概述
1．3．2神经节苷脂与神经发育
1．3．3神经节苷脂的神经保护作用
1．4目的与意义
2材料与方法
2．1主要的仪器及试剂
2．2试验动物及分组
2．3大鼠脑组织切片的制备
2．4尼氏染色
2．5免疫组织化学
2．6细胞培养及药物处理
2．8 Annexin V-FITC／PI试剂盒检测细胞凋亡率
2．9 RT-PCR方法检测相关通路基因表达
2．9．1引物设计
2．9．2组织和细胞总RNA的提取
2．9．3 RNA纯度和浓度的检测及完整性的鉴定
2．9．4反转录
2．9．4实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)
2．9．5 RT-PCR结果分析处理
2．10 Western Blot方法检测相关通路蛋白表达
2．10．1蛋白的提取及总蛋白浓度的测定
2．10．2 Western Blot法检测蛋白含量表达
2．11数据统计分析
3结果
3．1．1 CM1对氯胺酮致幼龄大鼠脑区神经细胞数量变化的影响
3．1．2 GM1对氯胺酮致幼龄大鼠脑区凋亡关键指标蛋白表达的影响
3．1．3 CM1对氯胺酮致幼龄大鼠脑区凋亡关键基因表达的影响
3．2 CM1对氯胺酮致PC12细胞凋亡的影响
3．2．2 GM1对氯胺酮致PC12细胞凋亡的影响
3．3 CM1对氯胺酮致幼龄大鼠及PC12细胞PI3K／AKT／GSK3β信号通路表达变化的影响
3．3．1 CM1对氯胺酮致幼龄大鼠PI3K／AKT／GSK3β信号通路表达变化的影响
3．3．2 CM1对氯胺酮致PC12细胞PI3K／AKT／GSK3β信号通路表达变化的影响
4讨论
4．1氯胺酮对幼龄大鼠神经元凋亡的影响
4．2 CM1对幼龄大鼠氯胺酮麻醉的神经保护作用
4．3 CM1对氯胺酮致PI3K／AKT／GSK3β信号通路表达变化的影响
5结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
