声明
摘要
1引言
1．1 IHN的流行病学特征及临床症状
1．2 IHN病原学
1．2．1 IHNV的分类地位及生物学特征
1．2．2 IHNV的培养特性
1．2．3 IHNV的基因组结构
1．2．4 IHNV的结构与非结构蛋白及其功能
1．2．5 IHN的防治
1．3 IHN疫苗研究及应用进展
1．4本研究目的与意义
2材料与方法
2．1试验材料
2．1．1病毒、细胞、抗体
2．1．2质粒与菌株
2．1．3实验动物
2．1．4酶类和主要试剂
2．1．5主要仪器及设备
2．1．6引物
2．2试验方法
2．2．4 IHNV HLJ-09株G截短基因片段克隆载体的构建及鉴定
2．2．5 IHNV HLJ-09株G截短基因片段表达载体的构建及鉴定
2．2．6重组蛋白的诱导表达及Western Blotting鉴定
2．2．7重组蛋白的纯化及Western Blotting鉴定
2．2．8重组蛋白鼠抗血清的制备
2．2．9重组蛋白鼠抗血清的酶联免疫吸附试验(ELISA)测定
2．2．10重组蛋白鼠抗血清对IHNV HLJ-09株的中和试验
2．2．11重组蛋白疫苗对虹鳟的免疫保护评价
2．2．12虹鳟攻毒保护试验
3结果与分析
3．1 IHNV HLJ-09株G截短基因片段的选择
3．2 IHNV HLJ-09株G基因截短片段的克隆及表达质粒的构建
3．2．2 IHNV HLJ-09株G基因截短片段的克隆及表达质粒的构建
3．3重组蛋白的表达及Western Blotting检测
3．4重组蛋白的纯化及Western Blotting鉴定
3．5抗IHNV鼠血清效价的测定
3．6抗IHNV鼠血清对IHNV HLJ-09株的中和试验
3．7重组蛋白疫苗对虹鳟幼鱼的免疫效果评价
3．7．1特异性抗体IgM的检测
3．7．2免疫后虹鳟血清的中和试验
3．8攻毒保护试验
4讨论
4．1表达IHNV G截短基因片段的选择
4．2目的片段的表达与检测
4．3抗体水平的评价
4．4重组蛋白免疫效果的评价
5结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
