红景天苷及其代谢产物酪醇在大鼠体内的药物代谢动力学研究

摘要

红景天苷及其代谢产物酪醇是景天科红景天属（Rhodiola）植物中广泛存在的两种酚类化合物，具有抗疲劳、抗衰老、抗缺氧、抗辐射以及抗癌等多种药理作用，可用于多种疾病的预防和治疗。
　　本文采用HPLC/PDA和LC-MS/MS的方法对给药红景天苷后大鼠血浆样品中的代谢产物进行鉴定，最终确定尾静脉给药50 mg·kg-1红景天苷后，大鼠血浆样品中可检测到红景天苷原药及其苷元代谢产物——酪醇;灌胃给药100 mg·kg-1红景天苷后，大鼠血浆样品中仅检测到红景天苷原药，苷元代谢产物未检出。
　　建立了测定大鼠血浆、组织、粪便、尿液和胆汁中红景天苷及其代谢产物酪醇的LC-MS/MS方法，并对生物样品测定方法进行了系统的方法学考证。采用Waters xTerraMS C18色谱柱(3.5μm，50×3.0 mm，USA)对样品进行分离;以水为流动相A，乙腈为流动相B，流动相配比为A/B=9/1，流速为0.3 mL·min-1，进样体积为20μL。负电离模式下，采用多反应监测（MRM）的扫描方式采集数据，红景天苷、酪醇及内标（4-乙酰氨基酚）定量离子对分别为299.0→118.8、137.0→118.9以及150.1→106.9。该方法简单、快速、准确、选择性强、线性范围宽，成功应用于红景天苷及其代谢产物酪醇在大鼠体内药物代谢动力学的研究。
　　考察了尾静脉给药50 mg·kg-1红景天苷和口服给药100 mg·kg-1红景天苷后，大鼠血浆中红景天苷及其代谢产物酪醇的药物代谢动力学规律。根据药物浓度-时间曲线分布情况及药代动力学参数可知，尾静脉给药后，血浆中红景天苷清除速率较快，4h后几乎全部清除，酪醇清除速率相对缓慢，但在给药后4h也达到了检出极限。根据AUC值可以推测，酪醇在血浆中的总量仅为红景天苷的2％。口服给药后，大鼠血浆中仅可以检测到红景天苷，其含量在给药后20 min左右达到峰值，口服红景天苷的生物利用度为51.97％。
　　考察了尾静脉给药50 mg·kg-1红景天苷后，大鼠各组织中红景天苷及酪醇的分布规律。结果表明，肝组织中红景天苷的浓度显著高于其他组织，其次为肾组织和心组织，其余的各组织中未检测到红景天苷;酪醇浓度在心组织中最高，其次为脾及肾组织（二者含量差异不显著），再次为肝、肺和脑组织。红景天苷及其代谢产物酪醇在各组织中清除速率高，给药4h后均检测不到响应。
　　比较分析了尾静脉给药50 mg·kg-1红景天苷后，各途径中红景天苷及其代谢产物酪醇的排泄情况。结果表明，红景天苷原药主要以尿液的形式排泄出体外，粪便、尿液和胆汁中原药排泄量占给药量的百分比分别为0.30±0.01％、64.00±4.15％和2.87±0.04％;酪醇在粪便、尿液和胆汁的排泄量占给药量的百分比分别为1.48±0.04％、0.19±0.01％及0.02±0.00％。由此可见，肾脏是红景天苷的主要排泄器官。
　　本文对红景天苷及其代谢产物酪醇在大鼠体内的药物代谢动力学进行了研究，明确了红景天苷及酪醇在大鼠体内的吸收、分布、代谢、排泄规律，为红景天苷临床用药及合理开发和应用提供了理论依据。

目录

摘要

1 绪论

1．1 红景天苷概述

1．1．1 红景天苷的结构及药理作用

1．1．2 酪醇的结构及药理作用

1．2 药物代谢动力学

1．2．1 药物代谢动力学的研究方法

1．2．2 药物代谢动力学的分析方法

1．2．3 药物代谢动力学的研究意义

1．3 红景天苷的药物代谢动力学研究进展

1．3．1 酚类物质药物代谢动力学研究进展

1．3．2 红景天苷药物代谢动力学研究进展

1．4 立题依据及目的意义

1．4．1 立题依据

1．4．2 研究目的意义

2 大鼠血浆中红景天苷代谢产物的确定

2．1 材料与仪器

2．1．1 材料

2．1．2 仪器

2．2 实验方法

2．2．1 常用试剂及标准液的配制

2．2．2 动物实验

2．2．3 样品制备

2．2．4 检测条件

2．3 结果与讨论

2．3．1 LC／PDA法确定代谢产物

2．3．2 LC-MS／MS法确定代谢产物

2．4 本章小结

3 红景天苷及酪醇在大鼠血浆中的药代动力学研究

3．1 材料与仪器

3．1．1 材料

3．1．2 仪器

3．2 实验方法

3．2．1 动物实验

3．2．2 标准曲线样品制备

3．2．3 样品的制备

3．2．4 检测条件

3．2．5 方法验证

3．2．6 药物代谢动力学参数分析

3．3 结果与讨论

3．3．1 色谱条件

3．3．2 方法验证

3．3．3 大鼠血浆中红景天苷及酪醇药-时曲线分布

3．4 本章小结

4 红景天苷及酪醇在大鼠组织中的分布研究

4．1 材料与仪器

4．1．1 材料

4．1．2 仪器

4．2 实验方法

4．2．1 常用试剂及标准液的配制

4．2．2 动物实验

4．2．3 标准曲线样品制备

4．2．4 样品的制备

4．2．5 检测条件

4．2．6 方法验证

4．3 结果与讨论

4．3．1 方法验证

4．3．2 红景天苷和酪醇在各组织样品中的分布

4．3．3 药代动力学参数

4．4 本章小结

5 红景天苷及酪醇在大鼠中的排泄研究

5．1 材料与仪器

5．1．1 材料

5．1．2 仪器

5．2 实验方法

5．2．1 动物实验

5．2．2 标准曲线样品制备

5．2．3 样品的制备

5．2．4 检测条件

5．2．5 方法验证

5．3 结果与讨论

5．3．1 方法验证

5．3．2 红景天苷及酪醇在粪便中的排泄研究

5．3．3 红景天苷及酪醇在尿液中的排泄研究

5．3．4 红景天苷及酪醇在胆汁中的排泄研究

5．4 本章小结

结论

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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