柳树枯萎病病原菌及其致病毒素和潜在风险性的研究

摘要

柳树枯萎病作为一种细菌病害，由于它的出现，一直困扰着柳树种植户。从19世纪以来就不断地给国外的柳树种植业带来毁灭性的灾难，成为国外地区柳树死亡的主要病害之一，同时因为没有好的防治措施，所以该病害不断蔓延加剧。
　　鄂尔多斯位于内蒙古的中部，地处我国的半干旱地区，旱柳为鄂尔多斯地区重要的绿化树种和造林树种，在防风固沙、防止水土流失等方面发挥着巨大的生态作用。自2012年以来，由于柳树枯萎病在全区大面积爆发，给该地区的柳树产业造成了严重的损失，同时该病害在我国尚属新病害，所以对于该病害的研究仍停留在空白阶段。
　　本试验采用传统微生物分离培养方法，从采集的柳树枝干中分离获得了3株细菌，经过柯赫氏法则的验证，确定了菌株111为柳树枯萎病致病菌，依据111菌株的培养特性、形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析比对，将菌株111鉴定为成团肠杆菌（Enterobacter agglomerans），是国内对于该病害第一次系统全面的报道。
　　根据鄂尔多斯地区林间柳树发病情况并结合当地柳树栽培和管理方式，制定了适合当地柳树枯萎病的病株分级标准。而且从2014到2015年期间对该病害发病规律进行了系统观察，并通过调查了解了该地区的柳树实际发病情况，为今后该病害防控提供了可靠依据。
　　利用不同极性大孔树脂对柳树枯萎病的病原菌的毒素进行了筛选，选出了吸附毒素的效果最好树脂型号NKA-9，为以后该病原菌的毒素提取开创了先河。
　　通过对该地区的地理因素、气候因素、生物因素和人为因素探讨，找出了柳树枯萎病潜在风险因子，并通过R值精确估算，是一个比较全面性评估，也可以作为柳树枯萎病的风险评估、预防、管理一个有用的参考指标，所以我们提出一个建议，政府执行方法才至关重要。

目录

摘要

1 绪论

1．1 柳树枯萎病研究概况

1．1．1 国内柳树枯萎病的相关研究

1．1．2 国外柳树枯萎病的相关研究

1．2 肠杆菌属与植物病害

1．3 致病毒素

1．4 毒素的应用

1．4．1 植物抗病品种的筛选

1．4．2 毒素在生产中的应用

1．5 毒素提取的方法

1．5．1 基于蒸馏的提取方法

1．5．2 基于溶剂萃取、重结晶的提取方法

1．5．3 基于膜技术的提取方法

1．5．4 大孔树脂毒素筛选

1．6 本研究的背景和研究目的

2 柳树枯萎病的病原菌鉴定

2．1 材料和方法

2．1．1 林间症状观察

2．1．2 病原菌分离纯化和保存

2．1．3 病原菌的致病性测定

2．1．4 再分离及菌株保存

2．1．5 柳树枯萎病病原菌的特征

2．2 结果与分析

2．2．1 柳树枯萎症状

2．2．2 病原菌的分离纯化和保存

2．2．3 病原菌的致测定

2．2．4 再分离结果

2．2．5 柳树枯萎病病原菌的特征

2．2．6 病原菌

3 柳树枯萎病危害调查

3．1 柳树枯萎病标准地调查

3．1．1 柳树枯萎病标准地调查

3．1．2 柳树枯萎病调查

3．2 调查结果

3．2．1 柳树枯萎病标准株调查结果

3．2．2 柳树枯萎病调查结果

3．3 本章小结

4 柳树枯萎病病原细菌毒素初步研究

4．1 材料与方法

4．1．1 致病毒素初筛

4．1．2 大孔树脂的选取

4．1．3 不同大孔树脂糖类含量比较

4．1．4 不同大孔树脂可溶性蛋白含量的测定

4．2 结果与分析

4．2．1 有效毒素的时间初筛结果

4．2．2 大孔树脂的选取结果

4．2．3 不同大孔树脂糖类含量比较

4．2．4 不同大孔树可溶性蛋白含量的比较

4．3 本章小结

5 柳树枯萎病传播的潜在风险性

5．1 有利于病原菌传播的因素

5．1．1 地理因素

5．1．2 气候因素

5．1．3 生物因素

5．1．4 人为因素

5．1．5 有害生物风险性R值的预估

5．1．6 本章小结

6 结论

参考文献

附录

攻读学位期间发表的学术论文

致谢

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