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降钙素转基因的细胞学实验研究

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前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

骨质疏松症研究进展

一定义

二分类

三流行病学

四病因学

五病理学

六发病机制

七基因治疗与骨质疏松

八展望

参考文献

后记

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摘要

降钙素是一类天然肽类激素,它是目前治疗骨质疏松最有效的药物之一。目前临床使用的降钙素主要是非人型降钙素,其来源有限、价格昂贵、且有弱的抗原性,限制了长期使用。基因治疗是将外源基因导入目的细胞并有效表达,从而达到治疗目的。骨质疏松症的发病与多种基因相关。若能将基因治疗技术应用于骨质疏松症的治疗,将会有巨大的经济效益和社会效益。本实验研究采用基因工程技术,构建降钙素表达载体,然后通过脂质体转染方法将其降钙素基因导入靶细胞-NIH3T3细胞,获得降钙素基因持续高表达的阳性克隆细胞株。  方法:1.获得降钙素基因及其克隆。2.构建人降钙素(humancalcitonin,hCT)基因的分泌性真核表达载体。3.降钙素基因在NIH3T3细胞的分泌表达。  结论:1.本研究为基因合成提供了一种新的可靠的方法;2.成功克隆了含小鼠IgKappa分泌信号和人降钙素基因的全长DNA序列;3.成功筛选出人降钙素基因分泌性真核表达载体pcDNA3.0-hCT;4.获得了降钙素基因持续高表达的阳性克隆的细胞株;5.为采用人降钙素基因治疗骨质疏松症的进一步研究奠定了基础。

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