4-烯-3酮甾体化合物的微生物转化和去氢表雄酮及其磷酸酯衍生物的合成

摘要

本文首先对甾体药物工业现状、甾体药物生产新资源的开发，微生物转化在甾体药物转化中的应用，甾体的微生物羟基化研究进展及新技术的开发进行全面综述。　　本文研究了其对4-烯-3-酮甾体类的微生物转化，并对微生物转化的产物进行分离、纯化和鉴定，考察了底物投料量、发酵初始培养基pH、摇瓶装量、有机溶剂种类、有机溶剂加量等对总枝状毛霉羟基化反应的影响，以自然界廉价易得的天然产物皂素为起始原料，经3步合成反应分为开环、氧化和水解，得到了醋酸妊娠双烯醇酮(简称双烯化合物)。优化了双烯化合物的反应条件，双烯产品总收率达到80％，并且以其为原料经肟化、贝克曼重排、水解合成了DHEA，为工业生产的改进提供了借鉴，为了进一步研究甾体磷酸酯的结构、性质与生物活性的关系，以三氯氧磷为瞵酰化试剂合成了去氢表雄酮DHEA磷酯化合物。

目录

郑重声明

摘要

第一章综述

1.1甾体研究发展概况

1.1.1黄体酮

1.1.2甾体工业的现状

1.1.3药物生产新资源的开发

1.2微生物转化在甾体药物合成的应用

1.2.1微生物反应类型

1.2.2化学法与微生物转化相结合的优点

1.3甾体激素微生物羟化的研究

1.3.1羟化酶的性质

1.3.2甾体微生物羟化的反应机理

1.3.3几种重要的羟化反应

1.3.4用于黄体酮羟化的菌种及生成的相应衍生物

1.3.5总枝状毛霉的黄体酮羟化及相应衍生物

1.4新技术在甾体药物微生物转化中的应用

1.4.1固定化细胞转化技术

1.4.2原生质体转化技术

1.4.3双水相转化技术

1.4.4混合培养转化技术

1.4.5顺序发酵

1.4.6超临界流体技术

1.4.7有机介质中甾体激素药物的微生物转化

1.5超声处理

1.6微生物转化反应器的研究开发趋势

1.7展望

第二章总枝状毛霉对4-烯-3-酮孕甾转化

2.1菌种的筛选和鉴定

2.2 4-烯-3-酮甾体的生物转化

2.3结果与讨论

2.4波谱分析与结构推导

2.5 7α，14α一二羟基-4-孕甾烯-3，20一二酮晶体结构分析

2.6 小结

附表

第三章总枝状毛霉培养基组成的优化

3.1培养基对收率的影响

3.2不同碳源对收率的影响

3.3葡萄糖浓度对收率的影响

3.4不同氮源对收率的影响

3.5蛋白胨浓度对收率的影响

3.6 KH2PO4浓度对收率的影响

3.7培养基初始pH对收率的影响

3.8摇瓶装量对收率的影响

3.9用于底物增溶的有机溶剂的选择

3.10丙酮加量对转化的影响

3.11不同投料量对收率的影响

3.12菌龄对甾体的收率的影响

3.13小结

第四章DHEA的合成以及甾体磷酸酯的制备

4.1DHEA的合成

4.2磷酸酯的设计合成

4.2.1去氢表雄酮磷酰化合物的合成

4.2.2结果与讨论

4.3纯化方法选择

4.4小结

实验部分

第二章实验部分

第三章实验部分

第四章实验部分

致谢

参考文献：

附图

攻读硕士学位期间发表论文