虾青素对HO诱导的大鼠原代成纤维细胞损伤的保护作用

摘要

随着抗氧化研究的不断深入，人们发现被广泛使用的合成抗氧化剂存在着诸多的弊端。因此高效、低毒的天然抗氧化剂成为了研究的重点。虾青素是一类存在于海洋鱼类和贝类中的类胡萝卜素，体内及体外的相关研究证明了虾青素的超强抗氧化能力。
　　 本文研究了虾青素对过氧化氢诱导的真皮成纤维细胞损伤的作用，以初步探讨这种物质用于防治皮肤老化的可能性。
　　 采用组织块法体外培养大鼠真皮成纤维细胞，建立H2O2诱导的体外培养的大鼠成纤维细胞氧化损伤的病理模型。取对数生长期的细胞分成六个实验组，分别为：正常对照组，氧化损伤模型组(H2O2)，低、中、高三个给药组(虾青素组)，阳性对照组(VC)。在培养液中加不同浓度的虾青素预保护细胞，H2O2诱导损伤。观察细胞形态学变化，MTT法检测细胞增殖活性，酶生化法测定细胞内MDA、SOD含量以及胶原蛋白含量，流式细胞仪AnnexinV-PI染色测定细胞凋亡率。①用H2O2处理后，成纤维细胞增殖活性、SOD活性和胶原蛋白水平显著下降，而MDA含量显著上升；用H2O2处理后，细胞凋亡率显著上升。②与损伤组相比，不同剂量组虾青素可以提高H2O2诱导损伤的大鼠真皮成纤维细胞增殖活性，增加SOD活性，促进细胞分泌胶原蛋白，且这种作用呈一定的剂量相关性；与损伤组相比，虾青素组可以降低大鼠真皮成纤维细胞丙二醛MDA含量，且这些作用呈一定的剂量相关性。③虾青素能显著降低H2O2诱导的大鼠真皮成纤维细胞的细胞凋亡率。
　　 实验证明虾青素可修复过氧化氢诱导的大鼠真皮成纤维细胞的损伤，其作用可能与虾青素能促进成纤维细胞增殖、增强抗氧化酶SOD的活力、抑制脂质过氧化物的形成，促进成纤维细胞分泌胶原以及降低细胞凋亡率有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩写词表

声明

第一部分 文献综述

1 虾青素的抗氧化作用以及应用前景

2 皮肤老化简介

3 皮肤老化的预防和治疗

4 抗氧化剂的研究进展

5 中药延缓皮肤衰老的研究现状

6 立题依据及实验内容

第二部分 实验与结果分析

1 材料

2 方法

2.1 成纤维细胞的体外培养方法

2.2 成纤维细胞的传代

2.3 体外氧化损伤模型的建立

2.4 实验分组与检测指标

2.5 统计学处理

3 结果与分析

3.1 成纤维细胞体外培养的生长特点

3.2 H2O2对成纤维细胞的作用

3.3 虾青素大鼠皮肤成纤维细胞增殖的影响

3.4 虾青素大鼠皮肤成纤维细胞MDA含量及SOD活性的影响

3.5 虾青素对成纤维细胞分泌胶原量的影响

3.6 虾青素对细胞凋亡率的影响

4 讨论

4.1 成纤维细胞体外损伤模型的建立

4.2 受试药物对氧化损伤的真皮成纤维的作用

结论

参考文献

致谢