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图表索引
中英文缩略词
引 言
材料与方法
1 实验材料和仪器设备
1.1 标本采集
1.2 菌株与载体
1.3 主要试剂
1.4 主要仪器设备
1.5 主要溶液配制
1.6 引物和连接肽Linker的设计
2 实验方法
2.1 技术路线
2.2 淋巴细胞总RNA的抽提
2.3 逆转录(RT-PCR)扩增cDNA
2.4 重链和轻链PCR产物DNA片段凝胶回收
2.5 Linker连接肽的合成和酶促磷酸化粘端
2.6 VH+Linker+VL的制备
2.7 制备载体质粒DNA
2.8 单链抗体基因库(ScFv)与噬菌粒载体pCANTAB-5E拼接
2.9 制备感受态大肠杆菌TGl
2.10 辅助噬菌体的制备
2.11 噬菌体的滴定
2.12 转化感受态大肠杆菌TGl和构建ScFv单链噬菌体抗体库
2.13 重组质粒的特异PCR鉴定
2.14 重组质粒的酶切鉴定和保存
2.15 阳性克隆基因序列测定
2.16 序列的比较分析
结果与分析
1 原发性胃癌患者癌周转移淋巴结总RNA的提取
2 RT-PCR扩增抗体轻链、重链基因片段
3 ’VH和VL基因片段的扩增
4 ScFv基因的组装与扩增
5 ScFv噬菌体单链抗体库的构建
6 阳性克隆质粒PCR扩增鉴定
7 阳性重组质粒的双酶切鉴定
8 酶切阳性质粒测序结果
讨论
1 单链抗体及其多样性
2 噬菌体抗体库库容量的增加
3 噬菌体展示抗体库技术
结论
参考文献(Reference)
综述 单链抗体在肿瘤诊治中的应用及研究进展
1 基因工程抗体
2 噬菌体抗体库技术
3 单链抗体的研究进展和在临床诊治中的应用
4 单链抗体(ScFv)与肿瘤诊治
5 单链抗体与胃癌的免疫基因治疗
6 应用及其展望
参考文献(Reference)
附录
个人简历、在学期间发表的学术论文
致谢