氟暴露及雌激素受体α基因多态性对女性生殖内分泌激素的影响

摘要

目的：
　　 探讨氟暴露对女性人群生殖内分泌激素的影响以及环境氟暴露与基因相互作用对氟病区人群生殖内分泌激素的影响，为氟对女性生殖内分泌影响的分子机制提供基本依据。
　　 对象与方法：
　　 依据水氟监测结果，2011年在河南省通许县随机选择4个高氟村和3个对照村，其中2个高氟村于2008年底实施了降氟改水工程。采用整群抽样方法选取调查地区本地生长或至少居住5年以上的18～48岁女性进行横断面调查，依居住地区分为高氟组（167名）、改水组（160名）和对照组（268名）进行问卷调查和健康体检，并采集晨尿和空腹静脉血。采用氟离子选择电极法测定尿氟水平;酶联免疫吸附法测定血清促性腺激素释放激素(GonadotropinRelesaingHommone，GnRH)水平;化学发光法测定血清促黄体生成素(LuteinizingHormone，LH)、促卵泡刺激素(Follicle-StimulatingHormone，FSH)、雌二醇(Estradiol，E2)及睾酮(Testosterone，T)含量。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP)和TaqMan(②)MGB探针法对ERα基因PvuⅡ(rs2234695)、XbaⅠ(rs9340733)、rs37985773个位点进行基因分型。数据分析采用SPSS12.0软件。
　　 结果：
　　 1.氟暴露对女性下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平的影响
　　 3组女性血清激素水平测定结果显示，高氟组、改水组和对照组女性血清T水平分别为1.11±1.68、0.62±0.66、0.55±0.32ng/ml，高氟组高于改水组和对照组（分别P＜0.05）。3组女性血清GnRH、FSH、LH及E2差异均无统计学意义（分别P＞0.05）。3组女性按照月经周期进行分层分析显示，卵泡期各激素水平差异无统计学意义（分别P＞0.05）。排卵期高氟组、改水组和对照组女性血清E2水平中位数分别为58.09、67.73、84.96pg/ml，高氟组低于对照组(P＜0.05);血清T水平中位数分别为0.55、0.45、0.55ng/ml，高氟组高于改水组(P＜0.05)，与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，其他激素水平差异无统计学意义（分别P＞0.05）。黄体期高氟组、改水组和对照组女性血清GnRH水平中位数分别为20.16、24.09、23.50ng/ml，高氟组低于改水组和对照组（分别P＜0.05）;血清E2水平中位数分别为64.60、81.47、74.55pg/ml，高氟组低于对照组和改水组（分别P＜0.05），他激素水平差异无统计学意义（分别P＞0.05）。绝经女性高氟组血清GnRH、LH、FSH水平均低于对照组和改水组（分别P＜0.05），其它激素水平3组间差异无统计学意义（分别P＞0.05）。
　　 2.氟暴露与基因相互作用对下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平的影响
　　 高氟组携带PvuⅡPp基因型女性血清GnRH水平低于携带PP基因型女性，与携带PP基因型女性相比差异无统计学意义(P＞0.05)。改水组携带XbaⅠXx基因型女性血清LH水平低于携带xx基因型女性（P＜0.05），与携带XX基因型女性相比差异无统计学意义(P＞0.05)。携带XbaⅠXx基因型女性血清FSH水平低于携带XX、xx基因型女性（分别P＜0.05）。
　　 高氟组携带PvuⅡPp和PP，携带XbaⅠXx，携带ERαrs3798577C/C、C/T和T/T6种基因型女性血清GnRH水平均低于对照组携带同种基因型女性(P＜0.05)。改水组携带XbaⅠxx基因型的女性血清LH水平明显高于对照组（P＜0.05），与高氟组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。高氟组携带XbaⅠXx和ERαrs3798577T/T基因型的女性血清E2水平明显低于其余2组(分别P＜0.05)。高氟组携带rs3798577C/C基因型女性血清E2水平明显低于对照组（P＜0.05），与改水组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。高氟携带PvuⅡPp、XbaⅠXx和rs3798577C/T基因型女性血清T水平明显高于改水组和对照组（分别P＜0.05）。
　　 3.氟暴露组携带PvuⅡpp基因型女性绝经年龄低于携带Pp基因型女性（P＜0.05），与PP基因型女性相比差异无统计学意义（P＞0.05）。对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。
　　 结论：
　　 1.饮水氟暴露可对成年女性血清E2水平产生影响，且主要表现在月经周期的排卵期和黄体期。
　　 2.饮水氟暴露与ERα基因多态性的相互作用可影响成年女性性激素水平，其中携带Pp和Xx基因型女性血清GnRH水平降低，携带Xx、C/C和T/T基因型女性血清E2水平降低。

目录

声明

摘要

图表目录

中英文缩略词对照表

1 引言

2 研究对象与方法

2．1 调查点及研究对象的选择

2．1．1 调查点选择

2．1．2 调查对象的选择

2．2 问卷调查及生物标本的采集

2．2．1 调查内容

2．2．2 生物样本的采集

2．3 实验方法

2．3．1 实验材料

2．3．2 主要试剂配制

2．3．3 尿氟测定

2．3．4 血清激素水平测定

2．3．5 基因多态性检测分析

2．4 数据处理

3 结果

3．1 调查对象基本情况比较

3．2 3组女性血清激素水平比较

3．3 ERα基因PvuⅡ、XbaⅠ和rs3798577多态性检测结果

3．3．1 ERα PvuⅡ、XbaⅠ基因分型结果

3．3．2 TaqMan探针法对ERα rs3798577进行基因分型的结果

3．4 ERα基因多态性人群分布特征

3．4．1 ERα基因多态性Hardy-Weinberg平衡检验

3．5 对照组携带 ERα不同基因型女性HPG轴各层面激素水平的比较

3．6 相同氟暴露水平下携带不同基因型女性HPG轴各层面激素水平的比较

3．7 不同组别携带同种基因型女性血清HPG轴各层面激素水平比较

3．8 ERα基因多态性及氟暴露与女性绝经年龄的关系

4 讨论

4．1 不同组别女性尿氟水平差异显著，降氟改水后体内氟水平下降

4．2 氟暴露对女性下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平的影响

4．2．1 氟暴露对女性血清GnRH的影响

4．2．2 氟暴露对女性血清LH和FSH水平的影响

4．2．3 氟暴露对女性血清E2和T的影响

4．3 饮水氟暴露与ERα基因多态性相互作用对成年女性血清下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平的影响

4．3．1 ERα基因多态性与成年女性血清下丘脑-垂体-卵巢轴激素水平的关系

4．3．2 饮水氟暴露与ERα基因多态性相互作用对成年女性血清GnRH水平的影响

4．3．3 饮水氟暴露与ERα基因多态性对成年女性血清LH和FSH水平的影响

4．3．4 饮水氟暴露与ERα基因多态性对成年女性血清E2和T水平的影响

4．4 饮水氟暴露与ERα基因多态性对女性绝经年龄的影响

5 结论

参考文献

综述

个人简历及在学期间发表的学术论文及研究成果

致谢