饮水氟暴露及雌激素受体α基因多态性对男性生殖激素的影响

摘要

目的：
　　探讨饮水氟暴露对男性生殖激素的影响以及饮水氟暴露与雌激素受体基因交互作用对地氟病区男性生殖激素的影响，为氟暴露对男性生殖激素的影响及其分子机制提供基础依据。
　　研究对象与方法：
　　根据饮水氟含量监测结果，于2011～2012年在河南省开封市通许县采取整群抽样法选择4个高氟村和3个对照村，其中2个高氟村已于2008年底完成了降氟改水工程。整群抽取调查地区本地生长的18～50岁男性进行现况调查，以居住地区分为高氟组（90名）、改水组（79名）和对照组（179名）进行健康体检和问卷调查，并采集空腹静脉血和晨尿。采用氟离子选择电极法测定尿氟水平;酶联免疫吸附法测定血清促性腺激素释放激素(GonadotropinRelesaingHornmone，GnRH)水平;化学发光法测定血清黄体生成素(LuteinizingHormone，LH)、卵泡刺激素(Follicle-StimulatingHormone，FSH)、雌二醇(Estradiol，E2)及睾酮(Testosterone，T)水平。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)法和TaqMan(@)MBG探针法对雌激素受体α（estrogenreceptor，ERα）基因PvuⅡ(rs2234693)、XbaⅠ(rs9340799)、rs37985773个位点进行多态性分析。数据分析采用SPSS21.0软件，检验水准α=0.05。
　　结果：
　　1.饮水氟暴露对男性下丘脑-垂体-性腺轴各层面激素含量的影响
　　各组男性血清激素含量检测结果显示，高氟组、改水组、对照组男性血清GnRH含量分别为20.25±14.91、25.22±7.82、27.15±19.13ng/ml，血清ABP水平中位数分别为12.53、12.53、15.30ng/ml，高氟组男性血清GnRH和ABP水平明显低于对照组，差异分别有统计学意义(P＜0.05)。高氟组、改水组、对照组男性血清FSH水平分别为12.77±15.75、7.82±7.29、9.57±6.26mIU/ml，血清E2水平分别为56.84±74.78、36.65±9.61、34.34±20.31pg/ml，血清T水平分别为3.53±2.18、4.42±1.36、4.29±1.30ng/ml，血清FSH和E2水平高氟组明显高于改水组和对照组，而T水平高氟组明显低于改水组和对照组，差异分别有统计学意义(P＜0.05)。高氟组，改水组，对照组男性血清SHBG水平中位数分别为21.08、20.96、32.05nmol/L，高氟组和改水组血清SHBG水平明显低于对照组，差异分别有统计学意义（P＜0.05）。
　　2.饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对男性下丘脑-垂体-性腺轴各层激素水平的影响
　　高氟组中，携带ERαPvuⅡpp基因型男性血清T水平高于携带Pp基因型男性，携带ERαrs3798577T/T基因型男性血清FSH水平分别高于携带C/T和C/C基因型，差异分别有统计学意义(P＜0.05)。改水组中携带ERαPvuⅡpp基因型男性血清FSH水平分别高于携带PP和Pp基因型男性，携带ERαXbaⅠXx基因型男性血清ABP水平分别低于携带XX和xx基因型男性，携带ERαXbaⅠxx基因型男性血清SHBG水平高于携带Xx基因型男性，差异分别有统计学意义（P＜0.05）。
　　在不同组别携带相同基因型血清激素水平的比较中，高氟组携带ERαPvuⅡPp，ERαXbaⅠxx以及ERαrs3798577C/T，C/C基因型男性血清GnRH水平明显低于对照组（分别P＜0.05）。改水组携带ERαPvuⅡPP，Pp基因型男性血清FSH水平明显低于对照组，高氟组携带ERαrs3798577T/T基因型男性血清FSH水平明显高于改水组和对照组（分别P＜0.05）。高氟组男性除携带ERαrs3798577T/T基因型外，携带3个位点其它基因型血清E2水平均显著高于对照组（分别P＜0.05）。高氟组携带ERαPvuⅡPp基因型男性血清T水平显著低于改水组和对照组（分别P＜0.05）。高氟组携带ERαXbaⅠxx和ERαrs3798577T/T基因型男性血清ABP水平明显低于对照组（分别P＜0.05）。除携带ERαXbaⅠxx和ERαrs3798577C/C基因型外，携带其他基因型高氟组男性血清SHBG水平均低于对照组(分别P＜0.05)，而携带ERαXbaⅠxx基因型男性血清SHBG水平高氟组明显高于对照组(P＜0.05)。
　　结论：
　　1.饮水氟暴露可对成年男性血清GnRH，FSH，E2，T，ABP和SHBG水平产生影响，高氟组男性血清GnRH，T，ABP和SHBG水平降低，FSH和E2水平升高。
　　2.饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用可对男性HPG轴激素水平产生影响。携带ERαPvuⅡPp和ERαXbaⅠxx基因型男性血清GnRH水平，携带ERαrs3798577T/T基因型男性血清FSH和E2水平,携带ERαPvuⅡPp基因型男性血清T水平，携带ERαXbaⅠxx和ERαrs3798577T/T基因型男性血清ABP水平，以及携带ERαXbaⅠxx基因型男性血清SHBG水平更易受氟暴露的影响。

目录

声明

摘要

图表目录

中英文缩略词对照表

1 引言

2 研究对象与方法

2．1 调查点及研究对象的选择

2．1．1 调查点选择

2．1．2 调查对象的选择

2．2 问卷调查及生物样本的采集

2．2．1 调查内容

2．2．2 生物标本的采集

2．3 实验方法

2．3．1 实验材料

2．3．2 主要试剂配制

2．3．3 尿氟含量测定

2．3．4 血清激素含量测定

2．3．5 基因多态性检测分析

2．4 数据处理

3 结果

3．1 调查对象基本情况比较

3．2 环境氟含量测定

3．3 不同地区男性血清激素及相关蛋白水平比较

3．4 ERα基因PvuⅡ、XbaⅠ以及rs3798577基因多态性检测结果

3．5 ERα基因PvuⅡ、XbaⅠ以及rs3798577位点多态性Hardy-Weinberg平衡及分布特征检测

3．6 3 组男性携带ERα不同基因型HPG轴各层面激素水平的比较

3．7 不同组别男性携带相同基因型血清HPG轴各个层面激素水平的比较

3．7．1 不同组别男性携带相同基因型血清GnRH水平的比较

3．7．2 不同组别男性携带相同基因型血清LH，FSH水平的比较

3．7．3 不同组别男性携带相同基因型血清E2，T水平的比较

3．7．4 不同组别男性携带相同基因型血清ABP，SHBG水平的比较

4 讨论

4．1 饮水氟暴露是调查地区氟进入机体的主要途径

4．2 饮水氟暴露对男性下丘脑-垂体-性腺轴各层激素水平的影响

4．2．1 饮水氟暴露对男性血清GnRH水平的影响

4．2．2 饮水氟暴露对男性血清FSH和LH水平的影响

4．2．3 饮水氟暴露对男性血清T和E2水平的影响

4．2．4 饮水氟暴露对男性血清ABP和SHBG水平的影响

4．3 饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对成年男性下丘脑-垂体-性腺轴血清激素水平的影响

4．3．1 ERα基因多态性与男性下丘脑-垂体-性腺轴血清激素水平的关系

4．3．2 饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对男性血清GnRH水平的影响

4．3．3 饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对男性血清LH和FSH水平的影响

4．3．4 饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对男性血清T和E2水平的影响

4．3．5 饮水氟暴露与ERα基因多态性交互作用对男性血清ABP，SHBG水平的影响

5 结论

参考文献

综述 饮水氟暴露以及性激素受体基因多态性对男性生殖影响的研究进展

A卷--------成人健康调查--------一个人信息

B卷-------健康体格检查表

C卷-------饮水型地方性氟中毒调查

个人简历及在学期间发表的学术论文及研究成果

致谢