蛋白酶体抑制剂MG132促进顺铂诱导非小细胞肺癌凋亡机制的研究

摘要

背景：
　　当今社会迅速发展，而生活环境却日益恶化，恶化的环境是恶性肿瘤发生的重要诱因之一。研究表明恶性肿瘤是目前全球发病率和死亡率最高的疾病之一，而近些年肺癌的发病率已跃居恶性肿瘤的首位，因此如何有效地治疗肺癌引起大家的重视。肺癌的治疗已进入手术、化疗、放疗、生物治疗、靶向治疗等联合治疗的新阶段，虽然手术切除肿瘤仍是目前最主要和最有效的治疗方法。但是由于早期肺癌患者并无明显的临床症状，延误了早起发现的时机。患者出现症状后再来医院就诊，约有50％-60％的患者已处于肺癌晚期(Ⅲ/Ⅳ)，而此时已经失去最佳的手术时机。因而对于晚期肺癌患者，化疗、放疗对其治疗占有重要的地位。由于化疗药物被广泛地使用在对肺癌的治疗，化疗药物的毒副作用以及肿瘤对化疗药物的耐药性已成为临床工作者难以克服的障碍。癌症的发生主要是由于细胞的DNA发生了基因水平的突变。因此肿瘤在化疗后复发，基因水平的突变造成了对化疗药物的多重耐药性。因此，寻找减小肿瘤对化疗药物的耐药性，提高化疗药物作用，毒副作用小的新的作用靶点已成为当今医学界探讨和研究的热点。蛋白酶体是近些年研究的热点，蛋白酶体广泛存在真核细胞中，可选择性降解细胞内的蛋白质，而蛋白酶体可以调控各种细胞过程，如蛋白质的加工和更新、细胞周期、信号转导、细胞分化和细胞凋亡等。蛋白酶体抑制剂可以通过阻断蛋白酶体通路从而抑制蛋白质的降解，诱导细胞凋亡。因此蛋白酶体抑制剂可以抑制肿瘤细胞内的蛋白质的降解，调节细胞周期，抑制肿瘤细胞生长和增殖，促进肿瘤细胞凋亡。而蛋白酶体抑制剂与化疗药物联合作用于肿瘤细胞，蛋白酶体抑制剂能否提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用，提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，本方面的研究较少。因此本研究通过蛋白酶体抑制剂与顺铂联合应用诱导肺癌A549发生凋亡，来分析蛋白酶体抑制剂对细胞凋亡的影响，为减小化疗药物的耐药性，提高肿瘤对化疗药物的敏感性提供了实验依据。
　　目的：
　　通过蛋白酶体抑制剂三肽基乙醛(MG132)联合顺铂(DDP)来探讨诱导肺癌A549细胞凋亡的影响，为进一步研究肿瘤对化疗药物的敏感性，提高化疗疗效提供实验依据。
　　方法：
　　采用细胞计数盒(CCK-8)法检测不同分组对肺癌A549的抑制率;通过采用Hoechst33342染色观察细胞的形态变化及荧光染色阳性细胞百分比;流式细胞术(FCW)检测细胞凋亡率;采用Westernblot法检测细胞中核转录因子NF-kB和凋亡相关蛋白caspase9的表达情况。
　　结果：
　　单用MG132组、单用DDP组细胞抑制率随时间和浓度明显增加，细胞核裂解，染色质凝集，细胞凋亡率增加。MG132和DDP联合作用组细胞凋亡率较单用DDP组明显增加，MG132和DDP联合作用组较单用DDP组，核转录因子NF-kB表达明显减少凋亡相关蛋白caspase9表达显著增加。
　　结论：
　　蛋白酶体抑制剂MG132与DDP联合作用促凋亡作用明显提高，其部分作用机制可能是蛋白酶体抑制剂MG132抑制肿瘤细胞中NF-kB的释放，提高了肿瘤细胞对DDP诱导凋亡的敏感性，迸一步增强下游凋亡相关蛋白caspase9的活化以及表达。

目录

声明

摘要

中英文缩略词表

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

综述一 蛋白酶体抑制剂在肿瘤治疗的研究进展

综述二 MG132诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究

个人简历及在校期间发表论文

致谢