异体脱细胞真皮基质对兔后巩膜加固后组织相容性及胶原含量变化的研究

摘要

背景与目的:
　　后巩膜加固术是使用加固材料加固眼球后极部巩膜薄弱部分，特别是加固对应黄斑区的后极部巩膜的一种手术。它既不损伤眼内组织结构，安全性又好，是目前预防病理性近视进一步发展，保护现有视力的有效方法。后巩膜加固术的效果和预后，与加固材料的选择有很大关系。理想的加固材料应当无毒、组织相容性好，有一定的弹性和韧性，易获取或合成，易保存与消毒，价格低、术中应用方便等。
　　异体脱细胞真皮基质是利用脱细胞专利技术，对人的真皮进行生化处理，保留细胞外基质成分与三维框架结构，而将可被宿主识别、引起较强免疫排斥反应的各种细胞成分尽量脱出。近年来在临床上应用较多，任何材料用于加固巩膜，都需要良好的组织相容性。本实验研究的是异体脱细胞真皮基质对兔后巩膜加固后，观察不同时期组织相容性及胶原含量、碱性成纤维细胞生长因子的变化。
　　实验材料及方法:
　　选用日本大耳白兔18只，雌雄各半，体重1.8-2.8kg，18只白兔随机分成A、B、C共3组，每组6只，将异体脱细胞真皮基质修剪为25×6mm的加固条带，同侧眼使用加固条带行后巩膜加固，另一眼施行相同手术操作但不放置加固条带。术后1月、2月、3月分别处死A、B、C组动物，取双眼，先肉眼观察，再光镜观察各组组织病理学特征，并用盐酸水解法测定实验眼巩膜的加固区域和对照眼相应区域羟脯氨酸(Hyp)的含量，免疫组化法观察加固区巩膜和对照眼相应区巩膜碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量。3组兔于室内饲养，室温20-25℃。
　　实验结果:
　　1.肉眼观察
　　术后1个月，加固条带边界清晰，平整贴附于自体巩膜上，连接不紧密，可轻微推动。对照眼相应区筋膜与巩膜的连接疏松，充血程度轻。术后2个月，加固条带与自体巩膜的连接较前紧密、不易推动，条带表面有纤维结缔组织膜包裹。对照眼相应区筋膜与巩膜之间连接疏松，充血不明显。术后3个月，加固条带边界稍模糊，与巩膜连接较紧密，且条带表面有较致密纤维结缔组织膜包裹，对照眼相应区无充血，筋膜与巩膜连接较紧密。
　　2.病理组织学检查
　　术后1个月，受体巩膜无明显溶解破坏，巩膜胶原纤维有炎症细胞浸润，加固条带胶原基质粗壮且排列规则，加固条带周围可见炎细胞浸润。对照眼相应区域巩膜内浸润少量炎细胞。术后2个月，受体巩膜胶原仍无明显溶解破坏，巩膜内的成纤维细胞增多，融合区附近可见少量新生血管，加固条带周边胶原纤维较杂乱疏松，可见一定程度溶解破坏现象，对照眼相应区巩膜胶原排列好，浸润的炎细胞减少。术后3个月，受体巩膜胶原无明显破坏，加固条带的胶原纤维较前溶解增加，融合区结缔组织增生。对照眼相应区巩膜内炎细胞更加减少。
　　3.羟脯氨酸(Hyp)含量检测
　　术后各时间段对照组巩膜加固区域的Hyp含量高于实验组巩膜加固区的Hyp含量，差异均有统计学意义(t=8.054，P＜0.001;t=10.027，P＜0.001;t=14.531，P＜0.001);在实验组中，2月组巩膜加固区的Hyp含量高于1月组，差异具有统计学意义(p＜0.001)。3月组的Hyp含量略低于2月组，差异无统计学意义(P＞0.05)。在对照组中，3月组Hyp含量高于1月组和2月组，差异有统计学意义(p＜0.001)。
　　4.碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量检测
　　在术后1月、2月和3月实验组巩膜加固区的bFGF含量明显高于对照组，差异具有统计学意义（t=2.598，P=0.027;t=1.989，P=0.048;t=5.092，P=0.001）;实验组中，3月组明显高于1月组，差异有明显统计学意义(P＜0.05)。对照组中，2月组与1月组和3月组相比均有统计学意义(P＜0.05)，1月组与3月组间差异无统计学意义(P＞0.05)
　　实验结论:
　　1.异体脱细胞真皮基质加固巩膜引起的炎症反应小，生物相容性较好。
　　2.异体脱细胞真皮基质加固巩膜后早期可引起轻度的免疫排斥反应，但随着时间延长，免疫排斥反应有减弱或停止趋势。
　　3.异体脱细胞真皮基质加固巩膜后可有效刺激bFGF的增长，对胶原增生和巩膜重塑有一定影响。

目录

声明

摘要

中英文缩写一览表

引言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 生物相容性

2 组织相容性

3 羟脯氨酸(Hyp)测量结果

4 bFGF含量测量结果

讨论

羟脯氨酸(Hyp)含量的变化

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量的变化

结论

附图

参考文献

综述 巩膜的发生与发展

个人简历及在校期间发表的学术论文

致谢