Bmi-1、OPN在宫颈鳞癌中的表达及其与浸润转移的关系

摘要

背景与目的：
　　宫颈癌是威胁女性健康最常见的第二大恶性肿瘤，且发病年龄逐渐年轻化，而影响其病死率及预后的主要因素是宫颈癌的浸润和转移。在宫颈癌的发展过程中，存在着各种与浸润转移相关的癌基因的激活和抑癌基因的失活。因此，临床中对宫颈癌的治疗和预后判断有赖于对宫颈癌的发生发展、浸润转移机制的分子生物学的研究。近年研究表明，上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation，EMT)与上皮细胞来源的肿瘤的浸润、转移有关，在口腔癌、肺癌、乳腺癌、肝癌、结肠癌、卵巢癌、前列腺癌等许多恶性肿瘤的原位浸润和远处转移过程中发挥了重要作用[1]。E-钙粘蛋白（E-cadherin）的表达下调和波形蛋白(Vimentin)的表达上调是EMT发生的主要特征。原癌基因Bmi-1(B-cell-specific Moloneymur ineleukemiavirusinsertionsite1,BMI-1)是多梳基因(poly combgroup genes，PcG)家族中的成员之一，在细胞的生长、增殖、凋亡调节和干细胞的自我更新中起着非常重要的作用[2]。研究表明，Bmi-1在许多肿瘤中表达上调，与恶性肿瘤的恶性转化有明显相关性。骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种钙结合磷酸蛋白。多项研究显示，骨桥蛋白与肿瘤的浸润、转移和恶性转化有密切相关性，所以OPN基因又被称为肿瘤转移相关基因。目前，在宫颈癌的浸润转移方面针对Bmi-1、OPN的研究文献较少。本课题通过检测Bmi-1、OPN和EMT分子标记蛋白E-cadherin、Vimentin在宫颈癌变过程中的表达，并分析其相关性，探讨Bmi-1、OPN在宫颈鳞癌浸润、转移过程中的作用。
　　材料与方法：
　　1、标本来源:收集2012年6月至2013年7月郑州大学第二附属医院病理科存档的宫颈蜡块标本126例，其中包括因子宫肌瘤行子宫全切术的正常宫颈组织20例、60例CIN组织（CINⅠ25例、CINⅡ19例和CINⅢ16例）和术前未经放化疗且术后病理确诊的宫颈鳞癌组织46例。
　　2、实验方法:采用免疫组化SP法检测20例正常宫颈组织、60例CIN组织（CINⅠ25例、CINⅡ19例和CINⅢ16例）和46例宫颈鳞癌组织中Bmi-1、OPN、E-cadherin和Vimentin的表达，并分析其相关性。
　　3、统计方法:采用SPSS17.0统计软件包对数据进行分析处理，定性资料的比较采用卡方检验或Fisher确切概率法，利用2×2配对资料进行相关分析。以P＜0.05定义为差别有统计学意义。
　　结果：
　　1、Bmi-1的表达:正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞状细胞癌组织中Bmi-1蛋白主要定位在细胞核中。Bmi-1在正常宫颈组、CIN组和宫颈鳞癌组中的表达逐渐升高，总体有差异(P＜0.05);其中正常宫颈组和宫颈鳞癌组、CIN组和宫颈鳞癌组相比均有差异(P＜0.05)。Bmi-1在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中的表达有差异(P＜0.05)，其中CINⅠ和CINⅢ相比有差异(P＜0.05)。宫颈鳞癌组织中，Bmi-1蛋白的表达与患者的临床分期、组织学分级和淋巴结转移有关(P＜0.05)。
　　2、OPN的表达:正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞状细胞癌组织中OPN蛋白主要定位在细胞质和细胞核中。OPN在正常宫颈组、CIN组和宫颈鳞癌组中的表达逐渐升高，总体有差异(P＜0.05);其中正常宫颈组和宫颈鳞癌组、CIN组和宫颈鳞癌组比较均有差异(P＜0.05)。OPN在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中的表达无差异(P＜0.05)，其中两两比较也无差异(P＞0.05)。宫颈鳞癌组织中，OPN蛋白的表达与患者的临床分期、组织学分级、组织浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05)。
　　3、E-cadherin的表达:在正常宫颈组织、CIN和宫颈鳞癌组织中E-cadherin蛋白主要定位于细胞膜。E-cadherin在正常宫颈组、CIN组和宫颈鳞癌组中的表达逐步降低，总体有差异(P＜0.05);其中两两之间相比均有差异（P＜0.05）。E-cadherin在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中的表达无差异（P＜0.05），其中两两比较差异也均无差异(P＞0.05)。宫颈鳞癌组织中，E-cadherin蛋白的表达与患者的临床分期、组织学分级、组织浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05)。
　　4、Vimentin的表达:Vimentin在正常宫颈组织中不表达，在CIN和宫颈鳞状细胞癌组织中Vimentin蛋白主要定位在细胞质中。Vimentin在CIN组和宫颈鳞癌组中的表达逐步升高，总体有差异(P＜0.05);其中正常宫颈组和宫颈鳞癌组、CIN组和宫颈鳞癌组相比均有差异(P＜0.05)。Vimentin在CINⅠ、CINⅡ和CINⅢ中的表达差异无统计学意义(P＜0.05)，其中两两相比差别也均无统计学意义(P＞0.05)。宫颈鳞癌组织中，Vimentin蛋白的表达与患者的组织浸润深度、临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05)。
　　5、宫颈鳞癌组织中Bmi-1、OPN、E-cadherin以及Vimentin的相关性:
　　(1)Bmi-1与E-cadherin的表达是负相关(r=-0.531,P＜0.05)，与Vimentin的表达是正相关（r=0.344,P＜0.05）;
　　(2)OPN与E-cadherin表达是负相关(r=-0.544，P＜0.05)，与Vimentin表达是正相关（r=0.368,P＜0.05）;
　　(3)Bmi-1与OPN表达是正相关(r=0.507,P＜0.05);
　　(4)E-cadherin与Vimentin表达是负相关(r=-0.341,P＜0.05)。
　　结论：
　　1、原癌基因Bmi-1、肿瘤转移相关基因OPN的高表达与宫颈鳞癌的组织学分级、临床分期和淋巴结转移密切相关，提示Bmi-1、OPN可能在宫颈鳞癌的发生发展和浸润转移过程当中发挥了重要作用。
　　2、Bmi-1、OPN可能是通过上皮-间质转化促进宫颈鳞癌的浸润和转移。
　　3、Bmi-1与OPN在宫颈鳞癌中的表达呈正相关，提示两者可能协同促进宫颈癌的浸润和转移。

目录

声明

摘要

中英缩略词对照表

前言

材料与方法

2．1 实验材料

2．2 免疫组织化学方法(SP法)

2．3 统计学方法

结果

3．1 Bmi-1、OPN、E-cadherin和Vimentin蛋白在不同宫颈组织中的表达

3．2 Bmi-1、OPN、E-cadherin和Vimentin的表达与宫颈鳞癌病理参数之间的关系

3．3 Bmi-1、OPN、E-cadherin和Vimentin在宫颈鳞癌组织中的相关性

讨论

4．1 上皮间质转化(EMT)与宫颈鳞癌

4．2 Bmi-1与宫颈鳞癌

4．3 OPN与宫颈鳞癌

4．4 Bmi-1、OPN、E-cadherin和Vimentin在宫颈鳞癌组织中的相关性及意义

结论

附图

参考文献

综述 Bmi-1和OPN在肿瘤浸润转移中的相关研究

攻读硕士研究生学位期间发表论文及获奖情况

致谢