HIF-1α、VEGF及NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

摘要

目的：
　　探讨HIF-1α、VEGF、NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌（Sinonasal squamous cell carcinoma，SNSCC）发生、发展过程中的作用机制，为该疾病的早期临床诊断、治疗策略及肿瘤恶性程度的评估提供实验依据。
　　材料和方法：
　　1.选取郑州大学第一附属医院鼻科于2009年5月1日-2014年5月1期间，手术切除的并且临床病例资料保存完整的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌患者的存档蜡块50例，每例标本的病理结果均经2位及以上专家确诊。所有患者术前均未行化疗、放疗及生物免疫治疗其他相关抗肿瘤治疗。另取22例正常下鼻甲黏膜组织的标本蜡块作为对照组。
　　2.免疫组织化学方法（SP法）检测HIF-1α、VEGF、NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌及正常下鼻甲黏膜组织中的表达及分布情况，比较三者在两组间的阳性表达差异有无统计学意义及分析两两因子之间的相关性，并分析三者与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌不同临床指标之间的关系。
　　3.统计学处理
　　所得实验数据使用SPSS17.0软件进行统计分析。两组独立样本等级资料（三个因子在鼻腔鼻窦鳞癌组和正常下鼻甲黏膜组中的表达强度）比较采用Mann-Whitney秩和检验，其余的两组独立样本之间阳性率的比较采用χ2检验，当组间的统计数据不符合χ2检验要求时，可采用Fisher精确概率法进行统计分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。HIF-1α、VEGF、NCX1两两之间的相关性研究采用Spearman秩相关分析，当r>0时代表两因子之间呈正相关，r<0代表两因子之间呈负相关，检验仍以P＜0.05为差异有统计学意义。
　　结果：
　　1.HIF-1α的表达细胞核是HIF-1α的主要表达场所，为大小不等的黄色、棕黄色颗粒状，阴性表现为蓝色颗粒。在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中，HIF-1α蛋白阳性表达率为阳性率为72％,正常下鼻甲黏膜组织中的阳性率为32%,二者差异有统计学意义（P<0.05）。HIF-1α在肿瘤Ⅲ-Ⅳ期的表达（84.38%）高于在肿瘤Ⅰ-Ⅱ期的表达（50%），并且两者之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组的表达（80%）明显高于无淋巴结转移组的表达（37.50%），并且两者之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α在SNSCC组织中的表达与发病年龄、患者的性别无关(P>0.05)。
　　2.VEGF的表达 VEGF主要表达于细胞浆，呈棕黄色颗粒物状，在鼻腔鼻窦鳞癌组织中，VEGF表达阳性率为76%，正常下鼻甲黏膜组织中的阳性率为18%，二者间差异有统计学意义（P<0.05）。VEGF在在肿瘤Ⅲ-Ⅳ期的表达（90.63%）高于在肿瘤Ⅰ-Ⅱ期的表达（55.56%），并且两者之间的表达差异具有统计学意义（P<0.05），VEGF的表达还与SNSCC患者的淋巴结转移有关，在有无淋巴结转移组之间的表达差异具有统计学意义（P<0.05），VEGF的表达与肿瘤的发病年龄、患者的性别无相关性(P>0.05)
　　3.NCX1的表达 NCX1蛋白主要表达在细胞膜上，在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中，NCX1蛋白阳性表达率为70%,正常下鼻甲黏膜组织中的阳性率为9%，二者差异有统计学意义（P<0.05）。NCX1在SNSCC的表达与SNSCC的临床分期有关，其中在SNSCCⅢ-Ⅳ期中的表达（96.88%）高于在肿瘤Ⅰ-Ⅱ期的表达（61.11%），差异具有统计学意义(P<0.05)，NCX1的阳性表达与肿瘤的有无淋巴结转移、发病年龄、患者的性别无关(P>0.05)。
　　4.HIF-1α、VEGF、NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中表达的相关性经Spearman秩相关检验后得出，HIF-1α与 VEGF在 SNSCC中表达呈正相关(r=0.453,P<0.05)，HIF-1α与NCX1在SNSCC中表达呈正相关(r=0.393,P<0.05)，VEGF与NCX1在SNSCC中表达呈正相关(r=0.342,P<0.05)。
　　结论：
　　1、HIF-1α、VEGF、NCX1的异常增高表达可能与鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的发生、发展有关；HIF-1α、VEGF的过度表达还可能促进鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的淋巴结转移。
　　2、HIF-1α、VEGF、NCX1三者在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌中的表达具有协同作用，HIF-1α和VEGF、HIF-1α和NCX1及VEGF和NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达均呈正相关。
　　3、HIF-1α、VEGF、NCX1可以在临床上作为诊断鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的潜在的分子标志物，鼻腔鼻窦鳞癌的恶性程度及患者早期诊断的预测可以以三者的表达程度作为指标。

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中英文缩略词

前言

实验步骤

1 实验材料的选取与实验方法

2 主要实验试剂及设备

3 组织石蜡切片的制备

4 免疫组化步骤（SP法）

5 对照设置

6 免疫组化的评分标准

7 统计学方法

结果

1 HIF-1α、VEGF、NCX1 在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌（SNSCC）组织及正常下鼻甲黏膜组织中（对照组）组织表达

2 HIF-1α、VEGF、NCX1在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中表达的相关性分析

3 鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中 HIF-1α、VEGF、NCX1 的表达情况与SNSCC临床指标的关系

附图

讨论

1 HIF-1α在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达、意义及可能作用机制

2 VEGF 在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达、意义及可能作用机制

3 NCX1 在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达、意义及可能作用机制

4 HIF-1α、VEGF、NCX1三者在SNSCC中表达的相关性

结论

参考文献

综述: 鼻腔鼻窦恶性肿瘤的研究进展

个人简历及在校期间发表的学术论文

致谢