女贞子及其主要成分齐墩果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡机制的研究

摘要

目的：探讨中药女贞子及其主要成分齐墩果酸能否诱导HL-60细胞凋亡以及诱导凋亡的机制。 方法：MTT实验检测女贞子以及齐墩果酸对HL-60细胞的生长抑制；DAPI染色实验检测细胞经药物处理后的核形态变化；细胞基因组DNA凝胶电泳检测基因组DNA的降解；蛋白质免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白酶的激活，及蛋白酶对底物的降解；流式细胞仪分析细胞经药物处理后细胞周期的阻滞。 结果：MTT实验证明女贞子和齐墩果酸对HL-60细胞的生长有明显的抑制作用，并表现为时间依赖性；DAPI染色检测到细胞核形态的变化，即核浓缩和核碎片的形成；琼脂糖凝胶电泳实验证明经药物处理后细胞基因组DNA被降解，可见较典型的DNA梯形带；蛋白质免疫印迹分析表明HL-60细胞经女贞子和齐墩果酸处理后，细胞内凋亡相关的蛋白酶，主要是caspase-9和caspase-3都被激活，并伴随死亡底物PARP(聚ADP核糖聚合酶)的降解；流式细胞仪结果分析表明女贞子及齐墩果酸都能引起细胞周期阻滞于G1期。 结论：实验证明女贞子和齐墩果酸在体外能够诱导人白血病HL-60细胞凋亡，诱导凋亡的途径是线粒体途径；齐墩果酸可能是女贞子发挥药理作用的主要有效成分。

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