HSP27mRNA、HSP70mRNA在培养的人晶状体上皮细胞中的表达

摘要

目的：通过观察高温氧化作用对人晶状体上皮细胞内热休克蛋白质(HSP)表达的影响，来探讨白内障的发病机制，试图证明HSP27、HSP70可能参与了对晶状体的保护作用。 方法：人HLB-C3细胞系(由中国医科大学附属第一医院的眼科学系提供)含15％的小牛血清在DMEM37℃培养箱里培育。培育后的晶状体细胞分为对照组和两个实验组(Ⅰ、Ⅱ)，实验组Ⅰ在高温(45℃)条件下培养30分钟后，于不同时间段(0h，2h，4h，6h，16h，24h)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平，实验组Ⅱ在氧化(50mmol/LH2O2)条件培养30分钟后，恢复至正常条件下，在生物介质中恢复于不同时间段(0h，2h，4h，6h，16h，24h)，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平，对照组于不同时间段(0h，2h，4h，6h，16h，24h)，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平，以β-actin作为内参校正，并对获得的指标进行统计学分析。 结果：生理状态下和高温、氧化状态下均有热休克蛋白质的表达，高温应激和氧化应激后2小时导致HSPmRNA的水平增加。统计分析发现HSP27、HSP70高温组和氧化组的表达明显高于对照组，有显著性差异(p＜0.05)。并且每组HSP27mRNA、HSP70mRNA的表达到达峰值的时间间隔从2h到6h不等。以后逐渐降低，但是他们全部在16h仍维持较高水平。 结论：HSP在晶状体上皮细胞里存在，并且在应激之后可被诱导产生。数据表明它可能在高温、氧化状态下对晶状体上皮细胞起重要保护作用。

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