热休克蛋白70在炎性牙髓组织中的免疫组化表达及意义

摘要

[目的]：采用“二步法”免疫组化法研究鼠牙髓在程度不同的机械性钻磨损伤刺激(浅磨、深磨、穿髓)后以及人牙髓在不同程度的龋源性因素刺激(浅龋、深龋、急、慢性牙髓炎)后HSP70的免疫定位；探讨在外界刺激因素不同的情况下HSP70在鼠及人的牙髓中是否有相同的动态表达；推测在牙髓受到外界刺激过程中HSP70所起的修复和应激保护能力。 [方法]： 一、选取wistar大鼠，雄性，24只，体重200～280克左右，根据不同的处理时间将24只大鼠随机分为6组，每组4只，即正常组、浅磨24h组、深磨24h组、穿髓24h组、穿髓3d组和穿髓7d组。麻醉后仰卧固定，用备好的高速涡沦钻分别在大鼠左右上颌第一磨牙合面进行机械性钻磨(浅磨组磨除釉质0.3mm，深磨组磨除釉质牙本质厚度0.7mm，穿髓组深度不宜超过1mm，并用探针刺探见出血点即可)。各组鼠分别按规定时间脱颈处死，迅速将左右侧上颌第一磨牙及周围牙槽骨的组织块放入10％福尔马林溶液(PH7.4)，4℃固定，脱钙、脱水、石蜡包埋。各标本作5um厚的石蜡切片，分别进行HE染色和免疫组化染色后，光镜观察并进行图象分析。 二、应用HSP70鼠抗人单克隆抗体，分别对10例健康牙髓、浅龋患牙牙髓、深龋患牙牙髓、急性牙髓炎和慢性牙髓炎5组牙髓进行HE染色和免疫组化染色，(所有标本取临床因阻生或正畸拔除的健康第三磨牙或前磨牙的牙髓和确诊存在炎症的第三磨牙牙髓)对HSP70进行免疫定位和分析。 [结果]：在对大鼠磨牙机械性钻磨损伤过程中，浅磨24h组和对照组HSP70在牙髓组织中只有个别标本可见弱阳性着色，与后四组相比(P＜0.01)。深磨24h组可见成牙本质细胞成纤维细胞阳性表达，血管内皮细胞弱阳性表达。穿髓24h组和3d组表现为急性炎症反应，HSP70在成牙本质细胞、血管内皮细胞、中性粒细胞中均呈强阳性表达，成纤维细胞呈阳性表达。至穿髓7d时为弱阳性表达，可能为修复期所致。 人牙髓标本结果显示①人牙髓在龋源性刺激(浅龋、深龋、急慢性牙髓炎)后同正常组牙髓相比其HE染色可观察到浅龋组变化不大，个别标本可见少量炎细胞浸润。其它组可观察到成牙本质细胞排列紊乱，牙髓的炎细胞浸润伴毛细血管扩张，有时可见修复性牙本质的形成和牙髓坏死的组织病理变化。②免疫组化染色可见HSP70在健康牙髓和浅龋牙髓中只有个别标本弱阳性表达，深龋组可见成牙本质细胞、成纤维细胞阳性表达。血管内皮细胞弱阳性表达。急性牙髓炎组牙髓细胞均呈强阳性表达，其中可见中性粒细胞呈强阳性表达显著。慢性牙髓炎组亦呈阳性染色，但染色程度不一致，总体偏弱。 [结论]：通过本试验研究证实了①在外界刺激因素不同的情况下HSP70在鼠牙髓及人牙髓中有相同的动态表达，且随着刺激程度的加深HSP70在牙髓中的表达有强弱不同的动态变化。②HSP70在牙髓炎症早期的强效表达能够保护牙髓细胞。③HSP70在牙髓炎症晚期弱表达。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语

声明

前言

文献综述：热休克蛋白在牙髓中的作用的研究进展

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

致谢