西洋参茎叶皂苷对PC12细胞脑缺血损伤的保护作用及bcl-2、bax凋亡基因表达的影响

摘要

目的：本研究旨在探讨西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞脑缺血损伤的保护作用及机制。 方法：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞((pheochromocytomacellline，PC12)是常用的神经生物和神经化学研究的细胞模型。本文以PC12细胞建立脑缺血五种损伤模型，利用MTT法检测了PQS对缺血损伤的PC12细胞的保护效应；采用LDH法，检测了PQS对细胞膜的影响。应用生物化学方法，借助于紫外分光光度仪，观察PQS对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤中抗氧化酶SOD(superoxidedismutase)、脂质过氧化物MDA(malondialdehyde)和NO含量，GLU神经毒损伤中NOS活性和NO含量的影响。应用RT-PCR法和琼脂糖凝胶电泳方法检测PQS对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。 结果：1.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p＜0.01)，以PQS100ug/mL保护最优。显著提高SOD活性和降低上清液中NO含量(p＜0.01);PQS250ug/mL、PQS100ug/mL组能显著降低MDA含量(p＜0.01)。2.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞自由基、咖啡因、NO损伤模型均具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p＜0.01)。3.西洋参茎叶皂苷(PQS)对PC12细胞GLU神经毒性损伤具有明显保护作用。表现为PQS可显著提高细胞存活力和降低LDH活性(p＜0.01)，显著降低NOS活性和NO含量(p＜0.01)。4.拟缺糖缺氧损伤后，PQS可上调bcl-2基因的表达，下调bax基因的表达。 结论：(1)PQS对脑缺血损伤细胞具有明显的保护活性，稳定了膜结构，保护细胞免受损伤。(2)PQS可明显提高SOD酶活性，降低MDA含量以及NOS酶活性和NO含量，表明PQS抗缺血保护机制是提高内源性抗氧化酶活力，增加自由基清除，降低NOS活性而减少NO的生成，减轻NO神经毒性损伤。(3)RT-PCR结果表明：PQs能够上调bcl-2基因和下调bax基因的表达，上调bcl-2与bax的比值，可能是通过调控凋亡基因的表达起到抗损伤保护作用。

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文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写

声明

前言

文献综述

第一部分 西洋参茎叶皂苷对PC12细胞脑缺血损伤的保护作用

材料与方法

结果

讨论

第二部分 西洋参茎叶皂苷对PC12细胞拟缺糖缺氧损伤凋亡相关基因表达的影响

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

附图