骨髓单个核细胞移植对大鼠脊髓全横断后nestin和Synapsin I表达的影响

摘要

目的：探讨同种异体骨髓单个核细胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）移植入脊髓全横断损伤大鼠对损伤脊髓组织局部微环境中巢蛋白（nestin）和突触素Ⅰ（Synapsin I）表达的影响及意义。
　　方法：100只清洁级Wistar大鼠（雌雄不限）随机取96只分为三组：正常对照组32只：切除相应的椎板不损伤脊髓；模型组32只：建立脊髓全横断模型；细胞移植组32只：建立脊髓全横断模型后，给予骨髓单个核细胞（BMMNCs）移植治疗。各组大鼠分别于不同时间段(3d、1w、2w、4 w)利用免疫组织化学技术和RT-PCR检测脊髓组织中nestin与Synapsin I的表达变化，利用MIAS-2000图像处理系统分析观察nestin和Synapsin I的阳性产物在脊髓的分布，并测量阳性产物的光密度值。采用SPSS21.0统计分析数据，组间比较,方差齐者采用完全随机设计资料的方差分析，样本间的两两比较用q检验；方差不齐者用成组设计多个样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis法)，样本间两两比较的秩和检验(Nemenyi法)；P<0.05为差异具有统计学意义，P<0.01为有显著性统计学意义。
　　结果：⑴BBB评分显示术后正常对照组在各时间点的BBB脊髓功能评分未见明显变化，属评分正常；细胞移植组和模型对照组都有恢复过程，其中细胞移植组较模型对照组的大鼠恢复较好，但均未达到正常组水平；术后4周时细胞移植组BBB评分较模型对照组增加显著，差别有统计学意义（P﹤0.05）。⑵免疫组织化学染色、RT-PCR及图像处理系统分析显示模型对照组在伤后约3d可见损伤区域附近nestin表达升高，2w达高峰，4w后nestin表达明显下调；细胞移植组在脊髓伤3d可见损伤区域附近nestin表达升高，1w达高峰，4w后nestin表达明显下调，且各时期与正常对照组、模型对照组相比较均有统计学差异（P<0.05）。细胞移植组与模型对照组Synapsin I在损伤3d后可见表达，1w、2w和4w的表达量在渐进增加，且各实验点Synapsin I的表达均低于正常对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；细胞移植组较模型对照组表达低，且差异具有统计学意义（P﹤0.05）。
　　结论：骨髓单个核细胞移植入全横断脊髓损伤处促进了大鼠后肢运动功能的恢复；植入的BMMNCs改变了局部的微环境上调了损伤脊髓内巢蛋白和突触素Ⅰ的表达。

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中文摘要

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前言

文献综述

一、骨髓单个核细胞的概述

二 、BMMNCs提取、分离

三BMMNCs对神经修复的研究

四、小结与展望

材料和方法

一、实验材料

二、动物实验

三、结果观察

四、数据分析

结果

一、术后动物一般情况

二、大鼠术后行为学评估

三、HE染色结果：

四、免疫组织化学技术检测结果

五、大脊髓组织RT-PCR检测结果

讨论

结论

参考文献

致谢

英文缩写

攻读学位期间发表的学术成果

附图