慢性刺激对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的影响及治疗研究

摘要

目的：为了探讨慢性刺激在糖尿病发生、发展过程中的作用，在应用链脲佐菌素加高脂高糖饮食诱导大鼠糖尿病的过程中增加了慢性刺激因素，从而观察慢性刺激在大鼠糖尿病发生、发展过程中对糖、脂代谢及内分泌系统功能的影响，为临床上糖尿病合并抑郁的预防和治疗提供有利帮助和借鉴。
　　方法：将清洁级雄性 Wistar大鼠60只，平均分为5组：正常组(N)；糖尿病模型组(DM)；慢性刺激组(CMS)；糖尿病+慢性刺激组(DM+CMS)及糖尿病+慢性刺激+褪黑素组(DM+CMS+MT)。以高脂高糖饮食结合腹腔注射链脲佐菌素的方法诱导2型糖尿病大鼠模型；应用慢性温和应激法诱导大鼠抑郁模型，及两者结合建立糖尿病合并抑郁的大鼠模型。观察各组大鼠一般状况，如体重、饮食、二便、毛色、精神状态等变化，检测血糖、血脂、胰岛素等指标，应用强迫游泳实验和高架十字迷宫实验检测其行为学变化，放射免疫方法检测 HPA轴内分泌激素中的促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT)水平的变化，通过免疫组织化学方法检测各组大鼠的促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和海马细胞caspase-3、bcl-2因子表达的变化。行为学指标采用配对T检验方法进行统计分析，其他指标检测结果采用单因素方差分析及两两比较的方法进行分析。
　　结果：
　　1.与正常组大鼠比较，各组大鼠均出现毛色灰暗；体重减轻，饮水量稍增加，食欲降低，自主活动减少等抑郁表现。
　　2.在各组大鼠行为学实验的观察中发现，除正常组大鼠外，其余各组大鼠在强迫游泳中的上窜时间均较实验前缩短，不动时间延长，均不同程度的出现了抑郁行为。高架十字迷宫数据显示，DM+CMS组大鼠进入开放臂的次数和时间却明显减少，大鼠出现了焦虑状态，MT也未能改善大鼠的焦虑行为。
　　3.除正常组和 CMS组大鼠外，其余各组大鼠血糖水平和血清胰岛素水平均明显升高，但胰岛素水平增加的幅度远超过血糖水平的升高幅度，导致胰岛素抵抗指数明显增加。且DM+CMS组较DM组升高明显，但DM+CMS+MT组大鼠胰岛素抵抗较DM+CMS组大鼠有所缓解。
　　4.各组大鼠的生化指标显示DM、DM+CMS及DM+CMS+MT组大鼠血脂水平均明显高于正常组大鼠。DM+CMS+MT组大鼠的血清CHO和TG水平较DM+CMS组大鼠有所下降。
　　5.应用放射免疫法检测发现，与正常组大鼠相比，各组大鼠血清 CORT和 ACTH水平均明显升高，DM+CMS组大鼠ACTH水平升高尤为明显，给予MT后，CORT和ACTH均有所下降。
　　6.免疫组织化学结果显示 DM、DM+CMS及 DM+CMS+MT组大鼠胰岛境界不清，形状不规则，体积变小，免疫反应阳性细胞数目有所减少。DM组、CMS组、DM+CMS组及DM+CMS+MT组大鼠下丘脑室旁核CRH阳性细胞增加，DM+CMS组大鼠最为明显。
　　7.与正常组相比，各组大鼠海马 caspase-3及 bcl-2的表达均有所改变，其中DM+CMS组大鼠海马caspase-3、bcl-2表达变化最为明显，caspase-3表达量增加，bcl-2表达量减少。
　　结论：
　　1.慢性刺激可加重 DM大鼠血糖、血脂代谢紊乱及胰岛素抵抗，MT对血脂代谢及胰岛素抵抗具有一定的改善作用。
　　2.慢性刺激可加重DM大鼠的焦虑和抑郁行为，MT对此无明显改善的作用。
　　3.慢性刺激可加重DM大鼠HPA轴功能亢进，MT能有效地缓解慢性刺激所导致的HPA轴功能亢进。
　　4.慢性刺激可以导致 DM大鼠脑海马神经元凋亡，MT可部分缓解这种脑海马神经元凋亡的过程。

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英文摘要

前言

文献综述

1.DM的基本概况

2.抑郁症的基本概况

3.DM与抑郁症共病的流行病学调查研究

4.DM与抑郁症共病的可能原因

5.HPA轴功能的紊乱是DM并发抑郁症的关键发病机理

6.MT在DM并发抑郁症中潜在治疗作用

7.展望

材料与方法

一、实验材料

二、实验方法

结果

1.大鼠一般情况观察

2.体重变化情况

3.强迫游泳实验

4.高架十字迷宫实验

5.血糖、胰岛素指标测定

6.血脂指标检测

7.HPA轴内分泌相关指标测定

8.免疫组化检测

讨论

1.动物模型的制备

2.慢性刺激与胰岛素抵抗的关系

3.慢性刺激与血脂代谢的关系

4.慢性刺激对糖尿病大鼠行为的影响

5.慢性刺激对糖尿病大鼠HPA轴功能的影响

6.慢性刺激对DM大鼠海马神经元凋亡的影响

结论

参考文献

致谢

英文缩写

攻读学位期间发表的学术成果

附图