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摘要
图及附表清单
英文缩略词表
第一章前言
1.1 PD-1/PD-L1
1.2巨噬细胞
1.3酵母微囊
1.4结肠癌
第二章巨噬细胞极化中PD-L1的表达
2.1 引言
2.2实验材料与仪器
2.2.1实验材料
2.2.2实验仪器
2.2.3 实验试剂
2.2.4 实验溶剂
2.3实验方法
2.3.1 细胞培养
2.3.2 PEMs分离培养
2.3.3巨噬细胞极化
2.3.4 ELISA
2.3.5 qPCR
2.3.6 Western Blot
2.3.7转染
2.3.8 AOM/DSS法构建小鼠结肠癌模型
2.3.10结肠长度检测
2.3.11 HE染色
2.4实验结果
2.4.1 巨噬细胞极化
2.4.2不同极型巨噬细胞PD-L1表达量差异
2.4.3 shPD-L1对巨噬细胞极化的影响
2.4.4 DAI
2.4.5结肠长度检测
2.4.6结肠组织病理切片
2.4.7结肠癌模型诱导过程中PEMs PD-L1表达量的变化
2.4.8结肠癌模型诱导过程小鼠血清IL-10、IL-12的变化
2.5结论
第三章基于酵母微囊口服基因递送系统的构建及性能表征
3.1 引言
3.2实验材料与仪器
3.2.1实验材料
3.2.2实验仪器
3.2.3 实验试剂
3.2.4实验溶剂
3.3.1 YGM制备
3.3.2透射电子显微镜(TEM)
3.3.3纳米激光粒度仪检测粒径和电位
3.3.6 YGM/PEI-shRNA给药系统的制备
3.3.7 FITC标记PEI
3.3.11 YGM/PEI-shRNA给药系统胃肠道稳定性考察
3.3.12细胞增殖率
3.3.13细胞周期
3.3.14细胞凋亡
3.3.15 RBITC标记YGM
3.3.16细胞吞噬
3.3.17胞内分布
3.3.18细胞转染
3.3.19 巨噬细胞吞噬YGM机制考察
3.3.20 YGM体内转运吸收途径考察
3.3.21 YGM肠道吸收时间考察
3.3.22体内分布
3.4实验结果
3.4.1 透射电子显微镜(TEM)
3.4.2纳米激光粒度仪检测粒径、电位
3.4.3琼脂糖凝胶电泳实验
3.4.4 YGM对不同N/P比PEI-shRNA复合物负载情况考察
3.4.5反应时间对包封率的影响
3.4.6不同pH值对YGM/PEI-shRNA复合物稳定性的影响
3.4.7体外模拟胃肠道稳定性考察
3.4.8细胞增殖率
3.4.9细胞周期
3.4.10细胞凋亡
3.4.11细胞吞噬
3.4.12胞内分布
3.4.13 细胞转染
3.4.14巨噬细胞吞噬YGM机制考察
3.4.15 YGM体内吸收途径考察
3.4.16 YGM肠道吸收时间考察
3.4.17体内分布
3.5总结
第四章YGM/PEI-shPD-L1抗肿瘤作用考察
4.1 引言
4.2实验材料与仪器
4.2.1实验材料
4.2.2实验仪器
4.2.3 实验试剂
4.2.4 实验溶剂
4.3实验方法
4.3.1模拟肿瘤微环境对巨噬细胞极化的影响
4.3.2划痕修复实验
4.3.3 Transwell迁移实验
4.3.4 YGM/PEI-shPD-L1抗结肠癌作用考察
4.4实验结果
4.4.1 PD-L1在模拟肿瘤微环境中对巨噬细胞M2型极化的影响
4.4.2划痕修复实验
4.4.3 Transwell实验
4.4.4 YGM/PEI-shPD-L1体内抗结肠癌作用考察
4.5总结
第五章全文总结
参考文献
个人简历
致谢