两种泥鳅性腺发生和分化的组织学与免疫组织化学研究

摘要

鱼类性腺发生、分化及发育受遗传和各种环境因子的影响，直接关系着鱼类生长和繁殖等重要的生命活动。本研究采用组织学和免疫组织化学方法，系统研究了两种泥鳅性腺发生、分化及周年变化的组织学特征及芳香化酶和雌激素受体的表达。 两种泥鳅性腺均是由原生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)和原生殖嵴共同组成未分化性腺，后分化为卵巢和精巢，且卵巢分化要早于精巢分化。泥鳅性腺发生于受精后14天，40日龄个体卵巢开始分化，至受精后55天卵巢分化完全；精巢于受精后55天开始分化，100天时分化完全。大鳞副泥鳅则是在受精后16天出现了未分化性腺，卵巢分化始于受精后25天，45日龄个体卵巢分化完全；精巢分化于受精后30天，于75天分化为Ⅰ期精巢。两种泥鳅性腺分化过程具有相似的形态学特征。 卵巢分化以前，两种泥鳅性腺中均未见芳香化酶和雌激素受体表达。在起始分化的卵巢中，卵原细胞胞质开始有芳香化酶和雌激素受体表达，且表达量随卵巢发育呈递增趋势。在未分化完全的精巢中，芳香化酶和雌激素受体呈免疫阴性，直到精巢分化完全时，在精原细胞胞质中才有芳香化酶和雌激素受体表达。 当年孵化的幼鱼，100 R龄左右时性腺进入Ⅰ期精巢或卵巢。两种泥鳅性腺周年发育基本同步，且具有相似的组织学特征。 在不同发育时期的卵巢中，芳香化酶和雌激素受体免疫阳性部位主要存在于卵原细胞胞质和核膜；小生长期卵母细胞胞质、核膜及滤泡细胞；大生长期阶段的卵母细胞胞质、卵被膜和滤泡细胞中。随着卵巢的逐步发育成熟，表达量有所降低。在两种泥鳅的精巢中，芳香化酶和雌激素受体免疫活性定位在不同发育时期的生殖细胞胞质中，间质细胞和足细胞也呈免疫阳性。 本研究为揭示芳香化酶和雌激素受体在两种泥鳅性腺发生、分化及发育过程中的作用提供了证据。

目录

文摘

英文文摘

声明

1.前言

1.1鱼类性别决定与分化的类型

1.1.1遗传性别

1.1.2生理性别

1.2鱼类生理性别的基础及调控

1.2.1鱼类性腺的发生与分化

1.2.2影响鱼类性腺分化的因素

1.3性激素调控性腺分化的机制

1.3.1性腺分化的神经激素控制

1.3.2性类固醇激素调控性腺分化的机制假说

1.3.3内外源性激素对性腺分化的作用

1.4鱼类性腺的发育及调控

1.4.1鱼类生殖细胞的发生与分化

1.4.2鱼类性腺的年周期变化

1.4.3性激素对鱼类性腺发育的调控

1.6本研究的目的及意义

2.材料与方法

2.1.实验材料

2.1.1试验动物

2.1.2主要仪器设备

2.1.3主要试剂

2.1.4本研究常用溶液配方及配制方法

2.2实验方法

2.2.1两种泥鳅幼体的获得及取材

2.2.2性腺周年变化过程取材

2.2.3光镜样品制备

2.2.4免疫组化样品制备

2.2.5免疫组织化学程序

2.2.6免疫组织化学结果分析方法

3.结果

3.1两种泥鳅性腺发生和分化过程的组织学观察

3.1.1性腺发生

3.1.2性腺分化

3.1.3性腺分化的完成阶段

3.2两种泥鳅性腺发生和分化过程中芳香化酶和雌激素受体表达的免疫组织化学研究

3.3两种泥鳅性腺发育周年变化过程的组织学观察

3.3.1卵巢的年周期变化

3.3.2精巢的年周期变化

3.4两种泥鳅性腺发育周年变化过程中芳香化酶和雌激素受体表达的免疫组织化学研究

3.4.1芳香化酶和雌激素受体在两种泥鳅卵巢不同发育时期的细胞中的表达

3.4.2芳香化酶和雌激素受体在两种泥鳅精巢中的表达

4.讨论

4.1两种泥鳅性腺发生和分化的规律

4.1.1两种泥鳅性腺的发生

4.1.2早期性别的判断及性腺分化的时间

4.1.3卵巢腔的形成方式

4.1.4性腺分化类型

4.2两种泥鳅性腺发生和分化过程中芳香化酶和雌激素受体表达的意义

4.3两种泥鳅性腺发育周年变化的规律

4.3.1两种泥鳅的人工繁育

4.3.2两种泥鳅性腺发育周年变化

4.3.3卵核中核仁的数目的变化

4.4两种泥鳅性腺发育周年变化过程中芳香化酶和雌激素受体表达的意义

4.4.1滤泡细胞中的芳香化酶和雌激素受体

4.4.2卵母细胞胞质中的雌激素受体

4.4.3芳香化酶和雌激素受体在卵母细胞不同发育时期表达变化

4.4.4芳香化酶和雌激素受体在精巢中的表达

5.结论

图版1

图版2

图版说明

参考文献

致谢