核苷类药物与人血清白蛋白的相互作用表征及应用研究

摘要

蛋白质是生命物质的基础。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的蛋白质,它可以贮存和转运许多物质,包括内源性化合物和外源性化合物。作为存储和转运蛋白,血清白蛋白的分析和测定对于研究药物的药理和药效都有非常重要的意义。荧光技术方法简便、快速、灵敏度高,在药物与蛋白质相互作用的研究中有着广泛的应用。在前人工作的基础上,本文综合多种实验方法,详细研究了N-(6-嘌呤)-蛋氨酸(PYMBA),8-溴腺苷,2'-脱氧尿苷,5-甲基尿苷等四种核苷药物与人血清白蛋白的相互作用,论文的主要内容共分为六个部分:
　　 第一章:主要介绍了蛋白质的结构和功能;核苷类药物活性:药物小分子与蛋白质相互作用的研究进展。
　　 第二章:首次利用光谱法与分子模拟相结合研究了新型核苷类化合物PYMBA与人血清白蛋白的相互作用;PYMBA与人血清蛋白之间主要通过疏水作用相结合,同时还存在氢键作用;分子对接研究说明PTMBA与人血清蛋白的结合位置位于人血清蛋白的亚区ⅡA,即位置Ⅰ。
　　 第三章:以荧光光谱法研究了模拟生理条件下8-溴腺苷与人血清白蛋白的相互作用,研究结果表明:8-溴腺苷对人血清白蛋白内源荧光的猝灭是由于形成了新化合物导致的静态猝灭过程,二者主要通过疏水作用相结合:根据F(o)ster能量理论,计算了8-溴腺苷在血清白蛋白上的结合位置即与色氨酸残基之间的距离r=3.66nm;并在二者相互作用的基础上,建立了以8-溴腺苷为分子探针,用同步荧光技术测定生物样品中蛋白质含量的新方法。
　　 第四章:应用荧光光谱法结合计算机模拟对接技术对脱氧尿苷与人血清白蛋白的相互作用进行了详细的研究,研究结果显示,脱氧尿苷与人血清白蛋白之间有较强的结合作用,在300K时结合常数为3.460×104L/mol;分子对接模型研究表明二者主要通过疏水作用和氢键相结合:并在二者相互作用的基础上,以脱氧尿苷为分子探针,测定了几种生物样品中蛋白质的含量。
　　 第五章:利用多种方法研究了5-甲基尿苷与人血清白蛋白的相互作用:运用Stem-Volmer方程计算了体系的猝灭常数,利用Lineweaver-Burk方程计算了二者的结合常数;根据能量转移理论计算了二者的结合距离为3.55-1nm;并基于二者的相互作用,建立了以5-甲基尿苷为分子探针,用同步荧光技术测定生物样品中蛋白质含量的方法,测定结果令人满意。
　　 第六章:总结了本论文研究得到的创新性研究成果,并对本研究领域的工作进行了展望。