猪转移因子、猪白细胞介素18以及水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的影响研究

摘要

猪细小病毒(PorcineParvovirus，PPV)是引起猪繁殖障碍综合症的主要病原之一，该病毒感染可引起感染母猪，特别是初产母猪流产，产出畸形胎、死胎、木乃伊胎等。近年来，猪细小病毒病广泛存在于世界各地的猪群中，给养猪业造成了巨大的经济损失。对该病尚无有效的治疗方法，临床上主要使用PPV疫苗进行免疫预防。PPV弱毒苗虽然免疫效果较好，但其本身存在散毒的危险，而灭活疫苗作为预防PPV的常用疫苗，虽然安全性较高，但由于主要引起的体液免疫应答，细胞免疫应答的水平较低甚至没有，从而导致免疫保护率不高，而造成机体长期持续性感染。因此提高疫苗免疫的保护性抗体水平和细胞免疫作用是防制PPV感染的关键。本文选用猪转移因子(TF)、猪白细胞介素18(IL-18)和水溶性酵母葡聚糖分别联合PPV灭活疫苗进行了动物免疫试验，初步揭示了3种免疫佐剂的调节作用，为PPV疫苗免疫增强剂的筛选提供了理论依据。研究内容如下：
　　 1.以猪转移因子作为免疫增强剂与PPV灭活疫苗联合分别免疫小鼠和仔猪，在免疫后0、1、2、3、4、5、6周应用ELISA方法和流式细胞仪分别检测免疫后小鼠及仔猪的体液免疫和细胞免疫水平。结果发现，与PPV灭活苗单独免疫组相比，猪转移因子联合PPv灭活疫苗组能引起CD3+、CD4+、CD8+细胞数量的增加以及IFN-γ水平的明显提高，但抗体水平的变化不大，表明猪转移因子主要增强PPV灭活苗的细胞免疫应答。
　　 2.以猪白细胞介素18作为免疫增强剂与PPV灭活疫苗联合分别免疫小鼠和仔猪，在免疫后0、1、2、3、4、5、6周应用ELISA方法和流式细胞仪分别检测免疫后小鼠及仔猪的体液免疫和细胞免疫水平。结果发现，与PPV灭活疫苗单独免疫组相比，猪白细胞介素18联合PPV灭活疫苗免疫组提高了抗体效价以及引起CD3+、CD4+、CD8+细胞数量的增加，均能不同程度的诱导IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌表达，其中以IFN-γ的表达量最大，结果表明猪白细胞介素18能够增强PPV灭活疫苗的体液免疫应答和细胞免疫功能。
　　 3.以水溶性酵母葡聚糖作为免疫增强剂与PPV灭活疫苗联合分别免疫小鼠和仔猪，在免疫后0、1、2、3、4、5、6周应用ELISA方法和流式细胞仪分别检测免疫小鼠及仔猪的体液免疫和细胞免疫水平。结果发现，与PPV灭活疫苗单独免疫组相比，水溶性酵母葡聚糖联合PPV灭活疫苗免疫组能够引起CD3+、CD4+、CD8+细胞数量的增加，尤其是CD8+T淋巴细胞数量的增加，抗体水平的变化不大，但均能不同程度的诱导IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌，其中以IL-4的分泌量最大。结果表明水溶性酵母葡聚糖主要增强PPV灭活疫苗的细胞免疫功能。