健脾补肾、益气养阴法对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制探讨

摘要

目的：观察健脾补肾、益气养阴法对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾损伤的发病机制,揭示中药复方治疗糖尿病肾损伤的作用机理。 方法：选用Wistar大鼠,通过高脂高糖饮食加腹腔小剂量注射链脲佐菌素复制糖尿病肾损伤大鼠模型,运用生化、光镜、电镜、免疫组化、逆转录聚合酶链反应等检测手段和方法,观测(1)糖尿病肾损伤大鼠一般状况；(2)24h尿微量白蛋白：(3)肌酐、尿素氮；(4)肾重指数；(5)免疫组化法检测肾脏中转化生长因子1、结缔组织生长因子及血管内皮生长因子表达；(6)逆转录聚合酶链反应检测肾内TGFβ1 mRNA、CTGF mRNA表达情况；(7)肾组织病理及超微结构。 结果：(1)糖尿病。肾损伤大鼠模型复制成功；(2)健脾补肾、益气养阴法能明显改善糖尿病肾病大鼠一般状况,改肾重/体重的比值,减少肌酐、尿素氮等小分子代谢产物,降低尿蛋白排泄；(3)对糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子具有良性调节作用：(4)能下调TGFβ1mRNA、CTGF mRNA的表达；(5)病理结果显示,健脾补肾、益气养阴法能修复糖尿病肾病大鼠肾小球及肾小管的病理损伤,保护肾功能,延缓肾衰竭。 结论：(1)糖尿病肾病为本虚标实之证,病及五脏六腑,气血经络,其脏腑虚损以脾肾为著,脾肾两虚是糖尿病肾病病理基础,健脾补肾、益气养阴法,切合本病病机特点,体现了中医辨证论治的整体性,是临床治疗糖尿病肾病的有效良方。(2)健脾补肾、益气养阴法具有良好的治疗糖尿病肾病的作用,改善大鼠一般状况,通过减少肌酐、尿素氮等小分子代谢产物,降低蛋白尿,从而改善糖尿病肾病大鼠的生存状态,改善肾功能,达到防治糖尿病肾病的目的。(3)通过抑制转化生长因子1、结缔组织生长因子及血管内皮生长因子蛋白表达,抑制TGF-β1 mRN A、CTGF mRN A表达,从而降低蛋白尿,抑制肾小球细胞及肾间质成纤维细胞合成ECM,抑制肾脏肥大,最终延缓了疾病的进展。(4)能修复糖尿病肾病大鼠肾小球及肾小管的病理损伤,保护肾功能。

目录

论文说明：缩略语表

声明

前 言

文献综述

一、中医学的认识和研究进展

1、消渴病的渊源和病名探讨

2、病因病机的探讨

3、辨证论治

二、现代医学研究

1、DN的流行病学研究

2、DN的发病机制

3、DN治疗药物的研究进展

4、DN模型研究进展

实验研究

一、实验材料

1、实验动物

2、实验药物

3、饲料配方

4、主要试剂

5、主要实验仪器

二、实验方法

1、溶液配制

2、STZ模型大鼠的建立

3、分组方法

4、给药方法

5、观察指标及检测方法

6、统计方法

三、实验结果

1、一般情况

2、对实验性DN大鼠2 4h尿蛋白的影响（见表1）

3、对实验性DN大鼠Bun、Scr的影响（见表2）

4、对实验性DN大鼠脏器系数(肾重／体重)的影响（见表3）

5、肾脏组织光学显微镜观察

6、肾脏免疫组织化学检测（见表4）

7、肾脏组织透射电子显微镜检查

8、肾脏TGF-β1 mRNA、CTGFmRNA的检测（（见表5及图1、2）

讨 论

一、健脾补肾益气养阴法治疗DN的中医理论依据

1、肾阴阳两虚是糖尿病久病及肾之本

2、脾肾亏虚是主要病机

3、辩证思想与立法依据

二、组方分析

1、对健脾补肾、益气养阴法的认识

2、健脾补肾、益气养阴法配伍原理

3、本法的特色，凸现配伍技巧

三、DN动物模型的建立

四、实验对照药物评价

1、中药对照药六味地黄丸

2、西药对照药苯那普利

五、作用机制探讨

1、具有改善大鼠一般状况，调节肾重指数的作用

2、具有良好的保护肾功能的作用

3、具有修复肾脏的组织损伤及超微结构的作用

4、抑制TGF-β1表达

5、抑制CTGF表达

6、抑制VEGF表达

六、健脾补肾、益气养阴法治疗DN的优势探讨

七、展望

结 论

致 谢

参考文献

附 图

攻读博士学位期间发表的论文

个人简历