地黄饮子对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤氧化应激及Ca2+通道的影响

摘要

目的:本课题通过建立Aβ损伤的PC12细胞模型，运用生物化学和激光共聚焦技术，试图分析Aβ与AD发生、发展的密切关系及相关机制，探讨地黄饮子防治AD的作用机理。 方法:离体培养的PC12细胞分为6组:空白对照组、模型组、对照组、安理申组、地黄饮子低剂量组、地黄饮子中剂量组、地黄饮子高剂量组。待细胞进入对数生长期后吸去培养液，分别加入空白培养液10％、正常脑脊液10％、安理申脑脊液10％、中药脑脊液低剂量5％、中剂量10％、高剂量20％，加培养液补至等量，37℃孵育2h。然后除空白组之外的各组加入4μL经老化处理的Aβ25-35(终浓度为10μmol/L)，建立AD细胞模型，空白组加入等量的培养液，继续孵育24h。然后收集培养液、离心细胞。对培养液进行MTT法和LDH的检测细胞生存活力:检测各组PC12细胞培养液中MDA、SOD、CAT、GSH-Px的含量;激光共聚焦法检测各组PC12细胞内钙离子与荧光探针结合后的荧光强度。 结果:一、地黄饮子能增强MTT代谢，减少LDH释放，改善Aβ25-35损伤后的PC12细胞生存状态，提高细胞生存活力;二、地黄饮子能降低Aβ25-35损伤PC12细胞培养液中的MDA含量，提高PC12细胞培养液中SOD的活性、提高CAT、GSH-Px的含量即抗氧化酶活性，提高自由基清除能力，减少自由基对PC12细胞的损伤;三、地黄饮子能抑制Aβ25-35损伤PC12细胞所致的钙超载现象，保护细胞膜结构;四、地黄饮子可能通过对细胞膜的保护作用，减少自由基对神经细胞的损害，进而提高细胞生存活力。 结论:地黄饮子可能通过抑制Aβ25-35损伤的PC12细胞所致的钙超载现象，减少LDH释放，改善细胞状态，进而提高抗氧化酶活性，增强自由基清除能力，减少自由基对神经细胞的损害，使细胞生存活力增强。

目录

声明

缩略语表

前言

文献综述

1祖国医药对老年痴呆病因病机的认识与治疗

1．2中医对AD病位的认识

1．3中医对AD病因病机的认识

1．4中医对AD病的辨证施治

2现代医学对老年痴呆病因病机的认识与治疗

2．1 Aβ及tau蛋白相关机制

2．2钙离子通道受损学说

2．3自由基损伤

2．4载脂蛋白E与AD

2．5乙酰胆碱与AD

2．6免疫异常与AD

3 AD的治疗

3．1改善胆碱能神经传递药物

3．2神经营养因子药物

3．3影响自由基代谢的药物

3．4钙离子拮抗剂

3．5雌激素

3．6非甾体抗炎药物

实验研究

1实验材料

1．3主要药品及试剂

1．4主要实验仪器

2方法

2．1中药脑脊液的提取方法

2．4检测方法

结果

3地黄饮子含药脑脊液对PC12细胞CAT含量的影响

5地黄饮子含药脑脊液对PC12细胞SOD含量的影响

7地黄饮于含药脑脊液对受损PC12细胞钙离子内流的影响

讨论

1脑脊液药理学的意义

2 A β诱导PC12细胞模型的意义

3安理申与AD

4地黄饮子与各指标的关系

4．1地黄饮子对细胞膜的保护作用

4．2地黄饮子对PC12细胞氧化应激的影响

5地黄饮子与AD

5．1肾虚精亏、髓海不足是AD的病理基础

5．2痰浊阻窍是AD发病的重要因素

5．3补肾化痰法是防治AD的重要方法

5．4地黄饮子的组成、组方分析

结论

致谢

参考文献

附图

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