内脏神经对犬急性坏死性胰腺炎时小肠屏障功能的影响

摘要

急性坏死性胰腺炎（ANP）是一种普外科常见的急危重症疾病，以发病凶险、病死率高著称。小肠不仅是重要的消化器官，而且还是机体免疫功能的重要组成部分，ANP时小肠功能明显出现障碍，临床常表现为腹胀等症状，小肠功能障碍发生后大量的细菌积聚于肠道并通过受损的肠壁移位至其他器官组织，引起肠外感染。细菌感染是急性坏死性胰腺炎发病过程中的重要环节，有研究表明继发于急性坏死性胰腺炎感染的细菌主要是来自于肠道菌群。继发感染导致的全身炎症反应综合征及多器官功能衰竭是急性坏死性胰腺炎的重要死因，直接死于感染性休克的病人约占19％。因此，积极保护肠道功能对于防治ANP继发感染显得尤为重要。目前，临床上为防治ANP继发感染需长期应用抗生素，然而这又容易导致肠道菌群失调，甚至出现多重感染。内脏神经对于调节内脏器官的功能及维持机体内环境稳定具有重要作用，“胆碱能抗炎通路”概念的提出使神经与炎症的关系成为近些年的研究热点，该理论认为在炎症反应过程中刺激迷走神经可产生抗炎作用。ANP是一种典型的炎症性疾病，内脏神经在其发病过程中对于小肠屏障功能的影响如何？目前尚无人研究。
　　目的：探索切断双侧内脏大神经对犬急性坏死性胰腺炎时小肠屏障功能的影响及胰腺、小肠的病理变化。
　　方法：选取健康成年（2-3岁）体重10-15Kg杂种犬（雄性）32只，随机分为假手术组（Sham operation，SO组）8只、急性坏死性胰腺炎模型组（acute necrotizing pancreatitis，ANP组）12只和ANP+内脏大神经切断组（Greater splanchnic nervetransection，GSNT组）12只。分别于术前2小时，术后12小时、24小时、3天、5天、7天抽取外周静脉血，检测血浆淀粉酶、D-乳酸、二胺氧化酶、内毒素、白介素-10、肿瘤坏死因子-α、白介素-6。7天后处死实验动物取小肠黏液检测 SIgA浓度，取小肠及胰腺组织行病理学检查，参照文献报道方法进行病理组织学评分。实验中途死亡动物放弃实验数据，并做死因分析。使用重复测量的方差分析、SNK-q检验进行统计学分析，P<0.05差异具有统计学意义。
　　结果：术前2小时，血浆TNF-α、IL-6、IL-10、D-乳酸、二胺氧化酶、内毒素、淀粉酶水平三组比较差别无统计学意义（P>0.05）；血浆TNF-α、IL-6、D-乳酸、二胺氧化酶、内毒素水平在术后12h、24h、3d、5d、7d，ANP组与SO组，GSNT组与SO组比较前者均显著高于后者，差别具有统计学意义（P<0.01），而GSNT组与ANP组比较明显偏低，差别具有统计学意义（P<0.01）；血浆 IL-10水平，在术后12h、24h、3d、5d、7d，ANP组与SO组，GSNT组与SO组比较前者均显著高于后者，差别具有统计学意义（P<0.01），而GSNT组与ANP组比较前者亦明显高于后者，差别具有统计学意义（P<0.01）；血浆淀粉酶水平在术后各时间点，ANP组和GSNT组均明显高于SO组，差别具有统计学意义（P<0.01），而ANP组和GSNT组之间比较无明显差别（P>0.05）；小肠黏液中SIgA浓度，ANP组、GSNT组与SO组比较均明显降低，差别具有统计学意义（P<0.01），GSNT组与 ANP组比较前者则显著高于后者，差别具有统计学意义（P<0.05）；小肠和胰腺病理学评分，ANP组、GSNT组与SO组比较均明显较高，差别具有统计学意义（P<0.01），但是GSNT组与ANP组比较前者明显低于后者，差别具有统计学意义（P<0.05）；SO组和GSNT组实验无中途死亡动物，ANP组死亡2只。
　　结论：
　　1.急性坏死性胰腺炎早期即出现肠道屏障功能障碍：通透性增加、免疫功能抑制。
　　2.切断双侧内脏大神经可减轻急性坏死性胰腺炎时犬全身炎症反应水平，降低肠道的通透性，提高肠道的免疫功能，对小肠屏障功能具有保护作用，同时还可减轻胰腺的病理损伤程度。

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第1章 绪论

1.1 研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究意义

第2章 材料与方法

2.1 实验动物

2.2 主要试剂及药物

2.3 主要仪器及耗材

2.4 实验动物分组

2.5 实验动物围手术期处理措施

2.6 血液标本的采集与检测

2.7 小肠黏液的收集及SIgA的检测

2.8 病理组织的收集与检测

2.9 统计学方法

第3章 实验结果

3.1 血浆TNF-α在三组各时间点的变化情况

3.2 血浆IL-6在三组各时间点的变化情况

3.3 血浆IL-10在三组各时间点的变化情况

3.4 血浆D-乳酸在三组各时间点的变化情况

3.5 血浆二胺氧化酶在三组各时间点的变化情况

3.6 血浆内毒素在三组各时间点的变化情况

3.7 血浆淀粉酶在三组各时间点的变化情况

3.8 小肠黏液SIgA浓度三组间比较

3.9 小肠病理学评分三组间比较

3.10 胰腺病理学评分三组间比较

3.11 实验中途死亡动物死因分析

3.12 实验动物术后一般情况

第4章 讨论

第5章 结论

参考文献

缩略语词汇表

附录Ⅰ 附图表

致谢

攻读学位期间的研究成果