花生栽培种和野生种人工杂交双二倍体的创制和鉴定

摘要

花生是世界上重要的油料和经济作物，中国是世界上最大的花生生产、消费和出口国。花生野生种具有栽培种不具备的优良性状，是改良花生栽培种的重要基因资源。
　　本研究主要内容包括：⑴为了导入和利用野生花生的优异基因，改良花生栽培种，本研究以前期创制的栽培种花生和二倍体野生种种间杂种F1为基础，对其中的6个种间杂种F1染色体加倍，建立了一种有效的染色体加倍方法，即利用MS+0.1 mg L–1 NAA+0.4 mg L–16-BA+3％蔗糖+0.05%秋水仙素固体培养基处理杂种F1组培苗的上部茎段，获得双二倍体试管苗的染色体加倍方法。并利用该方法成功获得了两个双二倍体AmE-4和AM1210。⑵为了准确鉴定AmE-4和AM1210的染色体组成，本研究综合利用分子标记、GISH/FISH以及寡聚核苷酸带型技术鉴定了加倍后的植株，结果显示AmE-4和AM1210染色体数均为60，且均包含了其父母本的染色体，证实了AmE-4和AM1210为双二倍体。⑶为了能够追踪和鉴定外源染色体，本研究以双二倍体及其父母本为模板进行分子标记筛选，最终获得了57个和69个能特异追踪双二倍体AmE-4中A. oteroi和AM1210中A. duranensis的染色体(片段)的显性共显性标记。为能够后续创制和鉴定AmE-4和AM1210的外源染色体变异系奠定了分子基础。⑷为了进一步了解双二倍体AmE-4和AM1210遗传特性，研究通过比较双二倍体与栽培种植株性状遗传差异，揭示了两个双二倍体的遗传特性，为下一步研究利用A. oteroi和A. duranensis优异基因提供了参考。此外，研究又进一步通过AM1210与栽培种回交获得了50条染色体的后代，为下一步创制外源添加系、代换系和小片段易位系奠定了材料基础。

目录

声明

第1章 文献综述

1.1 种间杂交利用途径研究进展

1.2 花生种间杂交细胞学鉴定研究进展

1.3 花生种间杂交分子标记鉴定研究进展

1.4 A.duranensis和A.oteroi研究利用进展

第2章 材料方法

2.1 材料

2.2 方法

第3章 栽培种和野生种人工杂交双二倍体的创制

3.1 种间杂种F1染色体加倍处理前后植株育性比较

3.2 种间杂种F1加倍效率分析

第4章 豫花9331-Arachis oteroi双二倍体的鉴定

4.1 分子标记鉴定

4.2 细胞学鉴定

4.3 分子标记筛选

4.4 双二倍体的植物学性状观察

4.5 讨论

第5章 四粒红-Arachis A.duranensis双二倍体的鉴定

5.1 分子标记鉴定

5.2 细胞学鉴定

5.3 分子标记筛选

5.4 双二倍体的植物学性状观察

5.5 双二倍体与栽培亲本回交染色体鉴定

5.6 讨论

第6章 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间的研究成果