声明
符号表
第1章 文献综述
1.1 光照对哺乳动物季节性发情的影响
1.2 速激肽及其受体基因的研究进展
1.2.1 速激肽及其受体基因的发现
1.2.2 速激肽及其受体基因的组织分布及表达
1.2.3 速激肽及其受体基因与哺乳动物生殖生理
1.3 垂体的结构和生理功能
1.4 PRL、LH和FSH的结构及其生理功能
1.4.1 PRL的结构和生理功能
1.4.2 LH的结构和生理功能
1.4.3 FSH的结构和生理功能
1.5 转录组测序技术在哺乳动物中的应用
1.6 速激肽及其受体基因表达激动剂／抑制剂的应用
1.6.1 速激肽及其受体基因表达激动剂
1.6.2 速激肽及其受体基因表达抑制剂
1.7 试验技术路线
第2章 试验设计和样本的采集
2.1 试验材料准备
2.1.1 试验动物
2.1.2 试验器具
2.2 试剂配制
2.3 动物模型建立
2.4 样本采集
2.4.1 组织样本采集
2.4.2 血液样本采集
第3章 下丘脑转录组测序与繁殖相关信号通路的筛选
3.1 总RNA提取
3.2 cDNA文库构建
3.3 转录组测序及质量评估
3.4 数据处理与参考基因组的比对分析
3.5 差异表达基因分析
3.6 基因功能注释及分类
3.7 KEGG代谢通路分析
3.8 测序结果可靠性分析
3.9 分析和讨论
3.10 小结
第4章 山羊速激肽及其受体基因克隆和生物信息学分析
4.1 主要试验仪器和试剂
4.1.1 试验仪器
4.1.2 试验试剂
4.2 cDNA克隆与序列测定
4.3 主要数据库及生物学软件
4.4 TAC1基因克隆及生物信息学分析
4.5 TACR1基因克隆及生物信息学分析
4.6 TACR2基因克隆及生物信息学分析
4.7 TACR3基因克隆及生物信息学分析
4.8 分析和讨论
4.9 小结
第5章 垂体原代细胞培养
5.1 主要试验仪器和试剂
5.1.1 试验仪器
5.1.2 试验试剂
5.2 试剂配制
5.3 山羊腺垂体细胞的分离和消化
5.3.1 分离
5.3.2 消化
5.4 细胞的培养和鉴定
5.4.1 培养
5.4.2 鉴定
5.5 添加速激肽及其受体基因外源激动剂／抑制剂后对垂体细胞分泌PRL的影响
5.5.1 添加基因外源激动剂后基因表达量及PRL激素水平的变化
5.5.2 添加基因外源抑制剂后基因表达量及PRL激素水平的变化
5.6 分析和讨论
5.7 小结
第6章 不同光照模式对循环血激素水平的影响
6.1 主要试验仪器和试剂
6.1.1 试验仪器
6.1.2 试验试剂
6.2 外周血中PRL含量的测定
6.3 外周血中LH含量的测定
6.4 外周血中FSH含量的测定
6.5 分析和讨论
6.6 小结
第7章 速激肽及其受体基因调节山羊分泌PRL机理的研究
7.1 主要试验仪器和试剂
7.1.1 试验仪器
7.1.2 试验试剂
7.2 HE染色
7.2.1 试剂配制
7.2.2 操作步骤
7.2.3 结果
7.3 免疫荧光
7.3.1 试剂配制
7.3.2 操作步骤
7.3.3 结果
7.4 免疫组化
7.4.1 试剂配制
7.4.2 操作步骤
7.4.3 结果
7.5 蛋白质免疫印迹
7.5.1 试剂配制
7.5.2 操作步骤
7.5.3 结果
7.6 速激肽及其受体基因在山羊12种组织中的表达
7.6.1 引物设计
7.6.2 TAC1基因在各组织中的表达量
7.6.3 TACR1基因在各组织中的表达量
7.6.4 TACR2基因在各组织中的表达量
7.6.5 TACR3基因在各组织中的表达量
7.7 长短光照条件下山羊24h体内PRL含量的变化
7.8 分析和讨论
7.9 小结
第8章 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果
