孕期酒精暴露对小鼠视皮质神经元树突棘和突触的影响

摘要

酒精滥用可以导致多组织和器官的损伤，主要影响部位是脑、肝、心血管系统和免疫系统。胎儿酒精综合征(FAS)就是由于孕期母体酒精暴露所导致的胎儿和儿童的严重损害。由于树突棘和突触在学习和记忆方面的特殊功能，因此人们常用它们在孕期或出生后酒精暴露中出现的病理改变来解释患者神经行为障碍的成因。为了更好的揭示孕期酒精暴露对突触和树突棘发育的影响，我们分析了P0-P30生前酒精暴露小鼠视皮质中树突棘和突触的超微结构，及其长时程效应。从妊娠第5天(E5)开始用酒精灌胃直至子鼠出生，建立FAS动物模型。采用DiI散射的方法标记视皮质锥体细胞树突棘，利用透射电子显微镜观察突触的超微结构。结果显示：1.在胚胎15天(E15)可以观察到不成熟的新生的突触，突触前终末内有临近胞体或突起的多形囊泡，突触后膜属于非特化部分，在突触前、后膜之间的突触间隙只有5～10nm，要比成熟的突触间隙狭窄。随着年龄的增加突触前、后膜逐渐增厚，突触间隙增宽至15～20nm。到p7时才能看到成熟的突触超微结构，这个时期可观察到Gray'sⅠ型和Ⅱ型突触。而突触的成熟与树突棘的分化是同步的，突触的特化可能依赖于树突棘的成熟和突触前囊泡成分的表达。同时，研究显示出突触的发生与新皮质的发育和成熟密切相关。2.孕期酒精暴露能够诱导子鼠视皮质锥体细胞树突棘的密度降低、长度增加，该变化具有剂量依赖性和长时程效应。同时突触超微结构也出现一定的改变，如：突触小泡减少和突触间隙变窄。树突棘和突触超微结构的改变可能是视皮质发育滞后的一种表现，其长时程效应则可能是儿童时期FAS中出现智力低下的一种原因。

目录

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英文文摘

声明

第一部分小鼠视皮质树突棘和突触的发育

1.前言

2.材料和方法

2.1实验动物及其靶部位-视皮质

2.2免疫细胞化学

2.3 Dil散射标记锥体细胞和树突棘

2.4电镜标本的制作与观察

2.5图像采集

3.结果

3.1超微结构水平神经元的成熟和突触的发生

3.2树突和树突棘的发育

3.3突触囊泡蛋白在视皮质发育过程中的表达

4.讨论

4.1超微结构水平的突触发生

4.2树突棘的发育和突触囊泡蛋白的表达

5.参考文献

6.附图

7.图版说明

第二部分孕期酒精暴露对小鼠视皮质神经元树突棘和突触的影响

1.前言

2.材料和方法

2.1实验动物和标本收集

2.2 Dil散射标记锥体细胞及其树突棘

2.3图像采集

2.4电镜标本的制作与观察

2.5统计学处理

3.结果

3.1孕期酒精暴露所致的树突棘的变化

3.2孕期酒精暴露和突触超微结构

4.讨论

5.参考文献

6.附图

7.图版说明

综述 神经纤维寻径及其化学机制

攻读硕士期间发表论文

致 谢