均匀设计法制备硝酸益康唑纳米粒滴眼液及应用兔眼后的药代动力学研究

摘要

目的：均匀设计法优化制备硝酸益康唑纳米粒滴眼液并测定其粒径、电荷、包封率及载药量等基本性质；高效液相法检测硝酸益康唑纳米粒滴眼液应用兔眼后房水和角膜中的药物浓度变化并分析其药代动力学特征。
　　 方法：单因素初选制备条件，测定硝酸益康唑纳米粒胶体液在自然光、避光、暴露于空气中及60℃真空干燥5小时后的吸光度，分析其不同制备环境下纳米粒的稳定性；用纯化水与PBS 缓冲液超滤稀释纳米粒，比较两者对粒径和电荷的影响，在纳米粒中添加透明质酸钠，聚乙烯醇，甘油，聚乙二醇，考察不同辅料添加下纳米粒粒径和电荷的变化，在pH值等于5.00和7.50之间考察纳米粒粒径和电荷，确定合适的酸碱度。在6个因素8个水平下制定均匀设计表，将测试结果综合评分，总分与影响因素多元线性回归，按回归方程确定制备条件并描述均匀设计法优选工艺下制备的硝酸益康唑纳米粒滴眼液的外观形态、电镜、粒径、电荷、包封率和载药量。取健康无眼疾白色日本长耳兔，随机分成纳米粒组和混悬液组，将用Vivaflow 50 超滤器浓缩的0.3％硝酸益康唑纳米粒滴眼液作为试验药物，0.3％硝酸益康唑混悬液作为对照药物。在单剂量组中：试验药物和对照药物分别单次50μl 滴于兔眼，在突击剂量组中：试验药物和对照药物每次50μl滴于兔眼，连续3次，每次间隔3min；均于最后一次给药后在5min、15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min和300min 10个时间点抽取房水，剖取角膜组织。样品处理后，采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定样品组织中益康唑的浓度，比较不同时间点兔眼房水和角膜的药物浓度变化和经时过程，分析其药代动力学特征,药动学参数处理采用3p97 药动学软件。
　　 结果：均匀设计法优选制备的ECZ-RS100-NP 滴眼液外观呈现淡蓝色乳光，电镜照片显示颗粒分散均匀一致，所得粒径为50.47nm，电荷为+31.04mV。包封率为87.63％，载药量为25.18％。
　　 在单剂量组中，房水中5min，角膜中5min、15min、30min、45min、60min、90min和120min 时间点纳米粒滴眼液组药物浓度均高于对照组，且两者比较具有显著性差异（P<0.01）。在突击剂量组，房水在5 min、15 min、30 min、45 min和120 min 时间点，角膜在时间点5 min,15 min,30 min 纳米粒滴眼液组药物浓度均高于对照组，且两者比较具有显著性差异（P<0.01 或P<0.05）。
　　 在房水中，单剂量点眼后实验组和对照组的达峰时间Tmax分别为5.0min和60min,实验组和对照组的半衰期t1/2分别为47.38min和51.95min，在0-300min的药物浓度－
　　 时间曲线下面积(AUC)分别为10.76(μg/ml)·min和86.47(μg/ml)·min。突击剂量点眼后实验组和对照组的达峰时间TmaX均为45.0min，实验组和对照组的半衰期t1/2分别为91.54min和150.35min，在0-300min的药物浓度－时间曲线下面积(AUC)分别为87.89(μg/ml)·min和241.74(μg/ml)·min。
　　 在角膜中，单剂量点眼后实验组和对照组的达峰时间TmaX均为5min；达峰浓度分别为：28.18μg/g和22.09μg/g；半衰期t1/2分别为44.68min和30.55min，在0-300min的药物浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为555.48(μg/mg)·min和830.96(μg/mg)·min，突击剂量点眼后实验组和对照组的达峰时间Tmax分别为30min和45min；达峰浓度分别为：
　　 31.73μg/g和28.44μg/g；半衰期t1/2分别为58.26min和57.79min，在0-300min的药物浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为2162.13(μg/mg)·min和2446.27(μg/mg)·min。
　　 结论：均匀设计法安排实验科学、合理、有效，所优选制备的硝酸益康唑纳米粒滴眼液粒径较小，Zeta 电位较高，包封率和载药量均理想。单剂量组兔眼角膜检测出的益康唑浓度比较，试验药物组浓度较高，突击剂量组，在45min 前，试验组房水中的浓度高于对照组，角膜中的浓度在15min 前高于对照组。硝酸益康唑纳米粒滴眼液具有较大的眼部应用前景。

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论文说明：缩略语表

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引言

1 均匀设计法制备硝酸益康唑纳米粒滴眼液

2 硝酸益康唑纳米粒滴眼液在兔眼内的药物代谢动力学研究

结论

附录

参考文献

综述 眼科用药的研究进展

参考文献

致谢