补益类中药生脉饮及杜仲雄花对秀丽隐杆线虫的抗衰老效果评估

摘要

我国目前正快速步入老龄化时代，衰老是导致慢性疾病最危险的因素之一，衰老，是一个渐进的生理功能完整性逐步丧失的过程，是一个伴随功能性受损、增加死亡可能性的过程。衰老和多种疾病相关，神经方面的疾病如帕金森症、血管方面的疾病如高血压、高血脂、糖尿病，以及恶性肿瘤等。这些疾病其发病率随年龄的增长而稳步增加。2014年，我国60岁以上老年人口数量达到2.1亿，大约占人总数的15.5％。人类步入老年之后为社会创造价值的能力降低，同时患有各种疾病的概率大大增加，为个人家庭带来了巨大的痛苦。寻找延长寿命的方法是我们科研工作者面临的巨大挑战。
　　延长寿命有利于改善人们的生活质量，避免人类遭受疾病的困扰。近年来，随着细胞生物学、基因学等现代科学技术的飞速发展，我们对衰老有了更深刻、更全面的认识，并找到了一些延长寿命的方法，已经能够实现初步的延年益寿，研究者发现相关基因控制着人类的寿命的长短和衰老的程度，并逐步应用到临床上。
　　目前常见的延长寿命的方法有：①热量限制；②传统中药；③单体药物；④运动锻炼。每种方法都有它的优势和缺陷，其中使用药物来减缓人类的衰老，以及延长人类的寿命简单而且方便，是研究的热点之一。
　　研究者使用老鼠、果蝇、线虫、甚至酵母菌作为抗衰老药物筛选的动物模型。有人质疑这些生物作为人类衰老模型的效用，现在的研究表明，这些物种寿命的影响因素有着都和人类相似的分子途径和过程。
　　生脉饮及其配方红参、麦冬、五味子是传统的补益类药物，其能补气血，延缓衰老，本研究以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)为模型生物，研究生脉饮对线虫寿命的影响，发现传统方剂生脉饮以及其配方中药饮片红参、麦冬可以明显的提高线虫的寿命，延缓线虫的衰老速度。为了探索生脉饮能延长线虫寿命的原因而检测了一系列的生理指标测试，并做了补益类杜仲提取物对线虫脂肪恢复的影响，研究结果如下：
　　（1）本研究检测了生脉饮及其配方中药饮片红参、麦冬、五味子对野生型线虫fem-1(hc17)的寿命影响。发现生脉饮48g/L的给药组能使线虫的平均寿命提高26.4%，最长寿命提高了4天，发现生脉饮中发挥主要延寿效果的是红参和麦冬。
　　（2）生脉饮提高了线虫的抗热休克能力。与空白组相比，浓度为48g/L的生脉饮提高最为显著，在35℃高温条件下，8h存活率从44.44%提高到64.44%，提高了20%的存活率；10h存活率从26.67%提高到46.67%，提高了20%的存活率。
　　（3）生脉饮能提高线虫抗氧化能力，并且抗氧化能力与其浓度成正比，生脉饮延长线虫寿命的机制可能与其抗氧化能力有关。
　　（4）检测了生脉饮对线虫生殖能力的影响，发现的生脉饮对线虫的生殖率不但没有负面影响，而且能增加其生殖能力。检查了生脉饮对线虫吞咽频率的影响，在给药第十天后，生脉饮组线虫的咽泵速率较空白组均明显提高，说明延长寿命的机制和热量限制机制没有关系。
　　（5）生脉饮能提高线虫肌肉的功能，发现生脉饮对线虫的自发移动能力有一定的提升，说明对肌肉功能有一定的提升。
　　（6）检查了杜仲雄华水提物对线虫脂肪的影响，经过膳食剥夺（dietary deprivation，DD）的线虫，恢复食物供给之后（AL），杜仲提取物对线虫脂肪回升累积速度的影响，发现杜仲能抑制线虫脂肪的恢复。
　　（7）生脉饮在给药的第8天，线虫脂褐素比对照组，光密度值降低了0.013，说明该药物对线虫的衰老具有明显的抑制作用。
　　（8）探索了生脉饮对线虫基因(daf-2/daf-16)缺失变异体的延长作用，探讨生脉饮发挥长寿作用的相关靶基因，为未来中草药抗衰老长寿在基因水平的作用机制提供了新的线索。
　　综上所述，生脉饮能够延缓秀丽隐杆线虫的衰老；生脉饮中发挥延缓衰老功效的主要为红参和麦冬这两味药材；与热量限制没有直接关系，生脉饮的部分抗衰老机制可能是通过抑制线虫的氧化应激反应以及增加线虫的肌肉运动而达到长寿效果。

目录

声明

第一章 抗衰老以及生脉饮的研究进展

1.1 衰老的研究现状

1.2目前衰老常见的学说

1.3延缓衰老的干预手段

1.4生脉饮的配方中药和杜仲的研究现状

1.5 秀丽隐杆线虫简介

1.6研究背景立体依据

二 抗衰老实验内容以及方法

2.1材料、仪器设备与试药

2.2操作步骤

第三章 实验结果与讨论

3.1生脉饮及其配方单味药对秀丽隐杆线虫寿命的影响

3.2生脉饮对热休克条件下线虫存活率的影响

3.3生脉饮对秀丽隐杆线虫抗氧化损伤能力的影响

3.4生脉饮对N2型线虫生殖能力的影响

3.5生脉饮对秀丽隐杆线虫吞咽能力的影响

3.6生脉饮对秀丽隐杆线虫自发移动能力的影响

3.7生脉饮对秀丽隐杆线虫体内脂褐素沉积的影响

3.8生脉饮相关延长寿命相关基因机制的探索

3.9杜仲雄花对恢复饮食后线虫脂肪恢复的测试

3.10实验中相关条件的探讨

第四章 结论

参考文献

致谢