棉花生长素结合蛋白基因表达载体的构建及其遗传转化研究

摘要

棉花是世界性的重要经济作物，在国民经济发展中占有十分重要的地位。中国是世界上最大的棉花生产国和消费国之一，稳定和提高棉花质量，已成为提高我国纺织品国际市场竞争力的重要内容。棉纤维是由棉花胚珠外珠被的表皮细胞分化发育而成的单细胞毛状体，其发育是一个细胞的快速分化和伸展的生物学过程，涉及到大量与细胞分化、伸长、成熟及纤维素代谢相关基因的表达，在此过程中植物激素起了重要的作用。现已证明，生长素对棉花胚珠纤维生长起着关键性作用。生长素结合蛋白ABP作为生长素信号传导途径中的关键因子，在植物细胞感受生长素信号过程中的具有重要的功能，但其作用详细机制还不十分清楚。 在本文中，我们首先对以栽培陆地棉品种徐州142及其无纤维突变体(fl)为材料，利用cDNAArray而获得的一个纤维特异表达的cDNA片段(GhABP)进行了序列分析，将这段cDNA序列在NCBI中做tBLASTp分析，发现GhABP蛋白共编码206个氨基酸，属于GLPs家族，其编码的氨基酸序列包含一个Cupin结构域；采用DNAMAN软件对编码蛋白的疏水性进行了分析，结果表明GhABP蛋白不含有明显的跨膜结构域；利用tBLASTp分析的结果，将GhABP蛋白用DNAMAN软件进行了Alignment分析，结果表明我们所得到的这段棉花cDNA序列在蛋白表达水平上是相当保守的。 因为该基因在纤维细胞中的特异性表达以及在棉纤维细胞快速伸长期优势表达，我们推测GhABP基因可能与纤维细胞伸长具有非常密切关系。为了研究该基因在棉纤维伸长发育中的生物学功能及其作用机制，本文构建了由棉花纤维特异表达启动子E6与35S强启动子驱动的该基因过量表达载体，通过农杆菌介导法转化棉花，获得了经PCR检测的阳性胚性愈伤组织。为近一步研究生长素结合蛋白在棉纤维发育过程中的功能奠定了基础。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：略词表

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章文献综述

第二章棉花生长素结合蛋白基因表达载体的构建及其遗传转化的研究

第三章讨论

参考文献

致谢

作者简介