奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌凝固酶基因分型研究

摘要

奶牛乳房炎是奶牛最常见的疾病之一，奶牛乳房炎因可以引起产奶量的下降，以及治疗费用的增加等因素而对奶业造成了巨大的损失，尽管多种病原微生物可以引起奶牛乳房炎，但在临床和亚临床的感染中，金黄色葡萄球菌的感染最为广泛，并且治疗困难。奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌分型的目的就是为了更好地了解金黄色葡萄球菌所致乳房炎的流行病学，为研究者及管理者能够采取有效的措施来控制金黄色葡萄球菌的感染提供一定的信息。最近报道的基于金黄色葡萄球菌凝固酶基因3末端存在81bp的重复序列而采取的PCR分型方法，因其方法简单，容易操作，重复性好，分型率高等优点，适合于大量的菌株分型，已被广泛用于人源及动物源菌株的分型研究。我国目前尚未见奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌分型的报道。 本研究，从黑龙江、山东、河南、湖北等地的10多个牛场中分离鉴定了30株金黄色葡萄球菌。建立了针对金黄色葡萄球菌凝固酶基因3末端81bp重复序列PCR分型方法，对30个分离株进行了凝固酶基因分型研究。结果30个分离株共分为5个基因型，其中基因2型进一步分为两个亚型；5个基因型中以基因3型为主要，占分离株的46.7％，其他依次为2、1、5和4型、分别占总分离株的23.3％、16.7％、10％和3％。凝固酶基因分型研究表明，在同一地区存在不同的基因型；而在不同地区也存在相同的基因型，这提示我们可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆株；然而，在黑龙江地区的20个分离株中，有14株属于基因3型，为本地区的优势基因型。进行抗生素敏感试验表明，这些分离株对常用抗生素的耐药率较高，对青霉素和链霉素的耐药率最高，分别达到63％和60％，并未发现耐万古霉素的菌株；凝固酶基因型的分布与耐青霉素菌株情况比较显示，耐青霉素的菌株以基因3型最多，为10株；占本型的71％。 为了进一步探讨各基因型与其主要致病因子之间的关系，通过PCR方法检测了30株金黄色葡萄球菌分离株的α溶血素、β溶血素以及白细胞毒素S(LukS)及F(LukF)等主要致病因子。结果，28个分离株均具有白细胞毒素基因F、S组分，产金黄色葡萄球菌β溶血素和α溶血素的菌株分别为8株3株，这些致病因子在各基因型菌株间的分布并不表现出相关性，而是广泛的分布在各个基因型菌株间。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章前言

第二章金黄色葡萄球菌的分离鉴定

第三章金黄色葡萄球菌凝固酶基因扩增分型研究

第四章金黄色葡萄球菌分离株的耐药性分析

第五章金黄色葡萄球菌主要毒力因子检测及分析

第六章结论

参考文献

致谢

作者简介