线粒体神经酰胺酶上调K562细胞Bcl-2蛋白表达的机制研究

摘要

神经酰胺酶(Ceramidase,CDase)是参与神经酰胺降解反应的关键酶类.它催化神经酰胺水解,生成鞘氨醇,与神经鞘磷脂酶(Sphingomyelinase,SMase)一起调节细胞内神经酰胺的水平.根据其作用的最适PH值不同,分为酸性、碱性和中性神经酰胺酶.在鞘氨醇激酶(分布于胞浆)的作用下,鞘氨醇迅速代谢为1-磷酸鞘氨醇(SPP).现在认为,SPP也是一种胞内第二信使,具有动员细胞内储存Ca<'2+>、促进细胞增殖及抑制细胞凋亡等多种作用.最近,又克隆了一种新的神经酰胺酶(ElBawab S et al.JBC 2000;275:21508-13),选择性定位于线粒体.提示线粒体存在着神经酰胺代谢途径,可能对线粒体的功能特别是抗凋亡功能产生影响.我们将线粒体神经酰胺酶基因转染到K562细胞,以此了解线粒体神经酰胺酶细胞生物学效应.上述结果说明,转染线粒体神经酰胺酶的K562TC细胞抗血清剥夺能力明显提高,与Bcl-2蛋白表达水平升高有关.引起Bcl-2蛋白水平升高的原因不是线粒体神经酰胺酶本身,而是其下游代谢产物SPP.该研究首次证明'线粒体神经酰胺—(线粒体神经酰胺酶)→鞘氨醇—(鞘氨醇激酶)→1-磷酸鞘氨醇'代谢途径调节Bcl-2蛋白水平.

目录

英文缩写(Abbreviations)

引言

第一部分稳定表达神经酰胺酶细胞株K562TC的建立

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

第二部分K562与K562TC细胞在周期分布、细胞毒药物抗性及血清剥夺耐受性方面的比较

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

第三部分稳定表达线粒体神经酰胺酶的K562TC细胞Bcl-2蛋白表达水平明显升高

前言

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

第四部分1-磷酸鞘氨醇上调K562细胞Bc1-2表达水平

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

附图

结论

综述以神经酰胺为中心的鞘磷脂代谢—调控细胞生物学效应的信号分子

致谢

个人简历