血管内皮生长因子基因多态性与非霍奇金淋巴瘤的关联研究

摘要

目的：血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是目前已知的作用最强的促血管生成因子之一，在生理性血管生成过程中(如胚胎发育、繁殖、伤口修复等)的作用是十分重要的。同时，VEGF对于肿瘤等病理过程也具有重要的调节意义，在肿瘤的生长和转移过程中有重要作用。VEGF基因至少有30个单核苷酸多态性(SingleNucleotide Polymorphism，SNP)位点，这些基因多态性可能通过影响VEGF的转录或表达而影响肿瘤的发生、发展和预后。研究显示-2578C和-1154G等位基因与增加乳腺浸润性癌风险有关，-1154G等位基因与黑素瘤肿瘤厚度、前列腺癌的发病和进展及肺肿瘤内VEGF高表达有关。近年研究表明VEGF与非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma，NHL)恶性程度相关，但目前尚未见有关VEGF基因多态性与NHL关系的研究报导。本研究旨在探讨该基因启动子区2578C/A以及3’非编码区(untranslated region，UTR)+936C/T SNP与NHL的关系。 方法：采用基于人群的病例-对照研究方法，收集431例NHL患者和400例健康对照个体的静脉抗凝血5ml，以蛋白酶K消化—饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态(polymerase chainreaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP)方法检测VEGF的基因型。NHL患者同时统计临床分期、免疫分型、骨髓浸润情况及生存状况等，对NHL患者根据其不同临床参数进行分层分析。数据统计分析采用SPSS 1 1.5版软件包(SPSS Company,Chicago，Illinois，USA)进行，P＜0.05认为有统计学意义。比较各位点基因型频率的观察值与预期值并进行卡方检验行Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的基因型、等位基因型分布比较采用行×列表或四格表卡方检验。以非条件Logistic回归法计算相对风险度的比值比(odds ratio，OR)及其95％可信区间(confidence interval，CI)。应用Kaplan-Meieranalysis计算生存率。 结果： 1.健康对照组中的VEGF-2578C/A、+936C/T多态性位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性分布在NHL患者组与正常对照组间差异无统计学意义(X2分别为1.788、2.524；P值分别为0.409、0.283)。-2578C、A等位基因频率及+936C、T等位基因频率分布病例组与正常对照组间差异无统计学意义(X2分别为0.045、0.907；P值分别为0.83、0.341)。 2.根据NHL患者临床特点进行分层分析2.1 NHL患者男性及女性间VEGF.2578C/A、+936C/T基因多态性分布差异无统计学意义(X2分别为2.006、1.680；P值分别为0.367、0.432)。-2578C、A等位基因频率及+936C、T等位基因频率分布在NHL患者男性及女性间差异无统计学意义(X2分别为1.703、0.685;P值分别为0.129、0.408)。 2.2 NHL患者VEGF-2578C/A多态性位点的基因型、等位基因在B及T细胞亚型间分布差异无统计学意义(X2分别为2.816、2.507；P值分别为0.245、0.1 14)。携带+936C/C基因型在T细胞型患者(70.2％)高于B细胞患者(64.7％)，+936T/T基因型在T细胞患者(2.0％)低于B细胞患者(7.1％)，分布差异有统计学意义(X2=5.187，P=0.033)。携带VEGF+936C/C基因型可能与部分T细胞淋巴瘤的临床特征及预后相关。+936 C、T等位基因在T细胞及B细胞NHL患者间分布差异无统计学意义(X2=3.383，P=0.067)。 2.3 NHL患者VEGF-2578C/A基因SNP的基因型分布在Ⅰ、Ⅱ期组及Ⅲ、Ⅳ期组NHL患者间分布差异无统计学意义(X2=3.63；P=0.163)。VEGF-2578C、T等位基因频率在Ⅰ、Ⅱ期组及Ⅲ、Ⅳ期组NHL患者间分布差异无统计学意义(X2为0.350；P值为0.554)。VEGF+936C/C基因型在Ⅲ、Ⅳ期组(69.2％)高于Ⅰ、Ⅱ期组(62.9％)，+936T/T基因型在Ⅲ、Ⅳ期组(3.4％)低于Ⅰ、Ⅱ期组(8.3％)，差异有统计学意义(X2=5.242，P=0.027)，OR值为0.37，95％CI为0.15-0.89，提示与+936C/C基因型相比，携带T/T基因型与低的临床分期相关。+936C等位基因频率分布在Ⅲ、Ⅳ期组(82.9％)高于Ⅰ、Ⅱ期组(77.3％)，+936T等位基因频率分布在Ⅲ、Ⅳ期组(17.1％)低于Ⅰ、Ⅱ期组(22.7％)，两组患者间差异有统计学意义(X2=3.859，P=0.049)。携带+936T等位基因与低的临床分期相关(OR=0.7，95％CI为0.49～1)。 2.4 NHL患者VEGF-2578C/C基因型分布在有骨髓浸润组(64.0％)明显高于无骨髓浸润组(50.4％)，C/A或C/A+A/A基因型频率在有骨髓浸润组(分别为31.4％、36.0％)明显低于无骨髓浸润组(分别为43.4％、49.6％)，差异有统计学意义(X2值分别为7.230、7.810，P值分别为0.007、0.005)，应用非条件logistic回归模型进一步分析提示：与CC型相比，携带CA或CA+AA基因型与减少骨髓浸润相关(OR值及95％CI分别为0.57，0.38-0.86和0.57，0.39-0.85)。-2578C等位基因频率在有骨髓浸润组(79.7％)高于无骨髓浸润组(72.1％)，A等位基因频率在有骨髓浸润组(20.3％)低于无骨髓浸润组(27.9％)，差异有统计学意义(X2=6.509，P=0.01)，OR值为0.66，95％CI为0.48-0.91。提示携带A等位基因与减少骨髓浸润相关。VEGF+936C/C基因型在有骨髓浸润组(70.9％)高于无骨髓浸润组(64.8％)，+936T/T基因型在有骨髓浸润组(2.2％)低于无骨髓浸润组(6.7％)，差异有统计学意义(X2=4.546，P=0.042)，OR值为0.31，95％CI为0.10-0.96，提示携带+936T/T基因型与减少骨髓浸润相关。+936C、T等位基因频率分布在两组患者间差异无统计学意义(X2=3.661，P=0.056)。 2.5 VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性分布在A组(无全身症状)和B组(有全身症状，包括：发热、消瘦、盗汗等)间差异无统计学意义(X2分别为1.400、2.715；P值分别为0.497、0.257)。-2578C、A等位基因频率及+936C、T等位基因频率分布在两组间差异无统计学意义(X2分别为1.343、0.340；P分别为0.247、0.560)。 3.本组病例共43 1例，其中随访资料可作生存关系分析的391例，中位随访时间23月(1-180月)，随访期间发生疾病相关死亡172例。应用Kaplan-Meier analysis计算生存率，应用多元回归分析模型计算危害比。结果显示VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性与NHL患者3年总生存率无关(P＞0.05)。结论： 1.VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性与NHL总发病无关。 2.VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性分布与NHL患者性别无关。 3.VEGF+936C/C基因型频率在T细胞型NHL患者高于B细胞型NHL患者，携带VEGF+936C/C基因型可能与部分T细胞淋巴瘤的临床特征及预后相关。 4.携带+936T等位基因与NHL者低的临床分期相关。携带+936T/T基因型与NHL患者低的临床分期相关。 5.携带VEGF-2578 CA或CA+AA基因型及+936T/T基因型与减少骨髓浸润相关；携带-2578A等位基因与减少骨髓浸润发生相关。 6.VEGF-2578C/A、+936C/T基因多态性与NHL患者3年总生存率无关。

目录

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摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 血管内皮生长因子基因多态性与恶性肿瘤关系研究进展

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