干眼症及正常人泪液中溶菌酶与转化生长因子β的检测方法及检测意义

摘要

目的：干眼症作为发病率较高的眼科疾病之一，其发病原因复杂而且多种多样。激素缺乏、年龄、自身免疫性疾病、环境、干燥的空气和蒸发，接触镜的配戴，睑缘炎、酒渣鼻和病毒损害等因素综合在一起形成了复杂的导致干眼症的原因。 据统计，美国有干眼病人超过5，000万，单纯从人口计算，推测我国干眼病人超过3亿。加强干眼发病机制的研究，探索我国干眼的临床特点，确定其诊断标准及其治疗是我国眼科界一项迫切的任务。 近年来对干眼症的诊断方法多种多样，但寻求既简单经济又有较高实用价值的诊断方法是我国眼科界同仁共同追求的目标。已有研究证实泪液溶菌酶(Lysozyme)及泪液中转化生长因子β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)在泪液中的含量均较高，且有研究表明泪液溶菌酶浓度测定比SchirmerI试验更能准确的判断泪分泌功能。 本实验对干眼患者和正常人泪液中溶菌酶及转化生长因子β2的浓度进行检测，并对转化生长因子β2的检测意义进行评估。通过与以往检测泪液溶菌酶方法进行比较而确立更为准确、方便、快捷，并且标本用量少及适用于低浓度酶液的检测方法，通过对泪液中转化生长因子β2进行检测，证实该指标可作为诊断干眼的相关性指标，为临床干眼的诊断方法提供更有价值的依据。方法： 1.入选病例：选择确诊为干眼的患者分为非干燥综合征干眼组(none sjǒgren syndrome，NSS)简称NSS组21例42眼和干燥综合征干眼组(sjǒgren syndrome，SS)简称SS组15例30眼，另选择正常人做为对照组26例52眼。 2.毛细玻管分别收集NSS组、SS组和正常对照组泪液，用微量快速比浊法检测泪液溶菌酶的含量。 3.毛细玻管分别收集NSS组、SS组和正常对照组泪液，用双抗体夹心ABC-ELISA法检测转化生长因子β2的含量。 4.将检测到的转化生长因子β2的浓度与SchirmerI试验方法及BUT试验方法进行比较确定此物质对诊断干眼的检测意义。 5.实验数据用X±S表示，应用SPSS12.0统计软件进行统计处理，采用的统计方法为t检验。 结果： 1.泪液溶菌酶的检测： 在不同组的所有个体样本中，应用微量快速比浊法对泪液溶菌酶含量进行检测，对照组为12.274±1.313ug/ml，NSS组为8.294±1.235ug/ml，SS组为8.446±1.113ug/ml。从中可以看出NSS组和SS组泪液中溶菌酶均低于对照组，经统计学处理对照组与NSS组有显著性差异(P＜0.05)，统计学处理对照组与SS组有显著性差异(P＜0.05)。此方法与以往检测泪液溶菌酶含量的方法相比较具有标本用量少，反应时间短，准确、灵敏度高的特点，适合低浓度酶液的测定。 2.泪液中转化生长因子β2的检测： 应用双抗体夹心ABC-ELISA法对不同组的所有个体样本中的转化生长因子β2进行检测，检测到泪液中转化生长因子β2的吸光度值(OD值)，依据标准曲线，查出样品中转化生长因子β2的含量。对照组浓度为41.518±21.304pg/ml，NSS组浓度为14.123±12.095pg/ml,SS组浓度为14.022±8.668pg/ml。从中可以看出，NSS组和SS组泪液中TGF-β2浓度均明显低于对照组，经统计学处理有非常显著性差异(P＜0.01，P＜0.01)；SS组泪液中TGF-β2浓度也低于NSS组，但经统计学处理无显著性差异(P＞0.05)。 3.泪液中转化生长因子β2与SchirmerI试验及BUT时间的相关性： 干眼组泪液TGF-β2与SchirmerI试验呈正相关，干眼组泪液TGF-β2与BUT时间呈正相关。 结论： 1.利用微量快速比浊法检测泪液中溶菌酶含量，NSS组和SS组泪液中溶菌酶均低于对照组，差异有显著性，表明此检验方法在临床诊断干眼症有意义，并具有标本用量少，反应时间短，准确、灵敏度高、适合低浓度酶液检测等特点。 2.利用双抗体夹,ABC-EIJSA法检测泪液中TGF-β2的表达，NSS组及SS组泪液中TGF-β2浓度均明显低于对照组差异有显著性，表明使用此法能够有效检测泪液中TGF-β2浓度。 3.对检测到的泪液中TGF-β2浓度与SchirmerI试验及BUT进行相关性分析结果表明泪液TGF-β2与后两者均呈正相关，表明检测泪液中TGF-β2的含量对于辅助诊断干眼症是可行的。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

附表

附图

讨论

结论

参考文献

综述 干眼的诊断方法及相关抗微生物物质测定方法的研究进展

致谢

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